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Fluorochrome,Fluoro-Gold :神經環路研究的全方位解決方案

發布者:艾美捷科技    發布時間:2025-06-03     
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Fluoro-GoldFG)是一種經典的逆行軸突熒光示蹤劑,廣泛應用于神經環路追蹤研究。其獨特的熒光特性(激發波長323 nm,發射波長408 nm)使其在組織切片或透明化處理中均能保持高靈敏度,且標記信號穩定無衰減。通過離子電泳注射技術,FG可在目標腦區形成微小注射位點,有效避免染料沿針道擴散,精準標記神經元胞體。產品采用0.2 M二甲胂酸鈉緩沖液(pH 7.5)預溶,可直接用于實驗,顯著提高操作效率

 

一.化學特性

激發/發射波長:323 nm(激發) / 408 nm(發射),與紫外或近紫外光兼容,適配多種顯微鏡系統。

化學穩定性:在0.2 M二甲胂酸鈉緩沖液(pH 7.5)中預溶解,避免自發結晶,可直接用于離子電泳或壓力注射。

低細胞毒性:實驗表明,注射后神經元存活率>95%,長期標記無顯著毒性。

 

二.核心優勢

高兼容性:與3DISCO等組織透明技術完美適配,結合雙光子顯微鏡可實現全腦/脊髓的三維立體成像,清晰展示神經元樹突及長程軸突。

 多場景應用:適用于活體動物(如大鼠、小鼠)的神經投射研究,也可與免疫組化、基因表達分析聯用,探索特定蛋白或基因在環路中的功能。

機制研究利器:成功應用于疼痛機制(如椎間盤退變神經長入)、焦慮/應激環路(如中央杏仁核GABA能神經元調控)等前沿領域。

 

三.五大應用場景

1.基礎神經環路解析

跨腦區投射:標記中央杏仁核(CeA)的輸入神經元,揭示其與下丘腦、前額葉皮層的功能連接。

單細胞精度:結合稀疏標記技術,實現單個神經元的長程投射追蹤。

 

2.疾病機制研究

痛覺敏化:在椎間盤退變模型中,FG標記背根神經節(DRG)中異常長入退變組織的神經元,證實TNF-α介導的痛覺信號傳導。

精神疾病模型:追蹤焦慮相關腦區(如終紋床核BNST)的GABA能神經元環路,解析應激反應的神經基礎。

 

3.多技術聯用創新

透明化成像:與3DISCO、iDISCO技術兼容,實現全腦尺度下神經元的三維重構。

分子標記聯用:與免疫熒光(如c-Fos、NeuN)、病毒示蹤(AAV-retro)聯用,同步解析神經元活動與連接組學。

 

4.再生與修復研究

神經再生評估:標記脊髓損傷后軸突再生路徑,定量分析神經營養因子干預效果。

干細胞治療追蹤:聯合熒光蛋白標記,示蹤移植干細胞與宿主神經環路的整合。

藥物開發工具

藥效評價:在神經退行性疾病模型中,通過FG標記評估藥物對突觸可塑性的調控作用.

 

5.技術突破與文獻支持

高分辨成像適配性:

FG標記的神經元在雙光子顯微鏡下可清晰分辨樹突棘結構,在光片顯微鏡中支持全腦自動成像分析。

跨物種適用性:

已成功應用于嚙齒類(小鼠、大鼠)、非人靈長類(獼猴)及斑馬魚模型。

權威期刊背書:

近3年,FG相關研究發表于Nature Neuroscience、Cell Reports、eLife等頂級期刊。

 

四.實驗方案優化建議

注射參數:

推薦濃度:2-4% FG溶液(溶于0.2 M二甲胂酸鈉緩沖液)。

離子電泳條件:5-10 μA正電流,7秒通/7秒斷,持續10-15分鐘。

組織處理:

固定:4%多聚甲醛灌注后,組織避光保存于30%蔗糖溶液。

切片:建議振動切片機(厚度40-50 μm)或冰凍切片(厚度20 μm)。

成像避坑指南:

避免甲醛過度固定導致的熒光淬滅,建議固定時間≤24小時。

使用抗淬滅封片劑(如ProLong Diamond)延長信號保存時間。

 

 為何選擇Fluoro-Gold?

與CTB、DiI等傳統示蹤劑相比,FG兼具低擴散性、高信噪比、多技術兼容性三大優勢,是復雜神經環路研究的理想選擇!作為Fluorochrome中國區代理,艾美捷科技將為您提供最全面的產品,歡迎咨詢~


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