Southern Biotech二抗指南

Southern Biotech作為二抗專家，為各位科研學者帶來了一份二抗選擇指南，再也不用擔心在選擇二抗的路上迷路啦！

選擇一種能夠提供良好性能的二抗需要考慮許多因素，包括一抗的特性、樣品、應用和檢測技術。那么什么是二抗，它是用來做什么的呢？

二抗，是一種用于檢測、定位或定量分析一抗的抗體。它能夠識別并結合到一抗的恒定區域，從而實現對一抗的標記或檢測。

一抗是直接針對目標抗原的抗體，用于識別和結合到樣品中的特定抗原。而二抗則是針對一抗的宿主物種或一抗的亞型，用于增強信號或提供檢測手段。

二抗在多種免疫檢測技術中發揮著關鍵作用，如免疫印跡（Western Blot）、酶聯免疫吸附試驗（ELISA）、免疫熒光（Immunofluorescence）和流式細胞術（Flow Cytometry）等。通過與一抗結合，二抗可以幫助放大檢測信號，提高檢測靈敏度。此外，二抗還可以通過與不同的標記物（如酶、熒光染料或放射性同位素）結合，實現多樣化的檢測方法。

二抗的使用具有以下優勢：

信號放大：由于一個二抗分子可以結合多個一抗分子，從而增加檢測信號的強度。

通用性：一種二抗可以與多種針對同一宿主物種的一抗結合，減少了為每個特定抗原準備單獨標記抗體的需要。

成本效益：與標記大量的不同一抗相比，使用標記的二抗更為經濟。

在選擇二抗時，需要考慮以下因素：

宿主物種匹配：二抗必須針對一抗的宿主物種，以確保特異性結合。

亞型特異性：如果一抗是某個特定亞型（如 IgG1、IgG2a 等），則需要選擇針對該亞型的二抗。

交叉吸附：為了減少非特異性結合和背景信號，應選擇經過交叉吸附處理的二抗，以去除與其他物種蛋白質交叉反應的部分。

標記物類型：根據實驗所需的檢測方法，選擇與合適標記物（如酶、熒光染料等）結合的二抗。

為什么選擇二抗應該是一個主要考慮因素？

一個精心挑選制作的二抗可以在您的數據質量上產生巨大差異，通過與一抗高靈敏度和特異性結合來支持一抗的性能。雖然二抗不能補償性能不佳的一抗，但一個好的一抗-二抗組合應該提供高信號、低背景，并清晰地回答您的科學問題。在本文中，我們將討論如何選擇二抗，涵蓋選擇過程中應考慮的不同因素。

您的二抗應針對一抗的宿主物種？

由于二抗應結合到一抗的恒定區，而恒定區的序列因物種而異，您需要選擇針對一抗宿主物種的二抗。例如，如果您的主要抗體是在小鼠中產生的，您將需要抗小鼠二抗。對于大多數研究，您的二抗可以在除了一抗產生物種的任何物種中產生。以上述情況為例，您可以使用抗小鼠二抗，比如兔抗小鼠二抗或山羊抗小鼠二抗等。

你的二抗應該針對一抗的同型抗體。

因為二抗應該與一抗的固定區域結合，而固定區域的序列取決于一抗的同型，所以你需要選擇針對一抗同型的二抗。
例如，如果你的一抗是小鼠IgM，你就需要一種針對小鼠IgM的二抗，即抗小鼠IgM?；蛘?，如果你的一抗多克隆抗體的同型是兔IgG，你將需要一種針對兔IgG的二抗（抗兔IgG）。

免疫球蛋白同型（類別）和亞類

- 免疫球蛋白類別 - IgG、IgM、IgA、IgD、IgE

- 小鼠免疫球蛋白亞類 - IgG1、IgG2a/IgG2c、IgG2b、IgG3

- 人類免疫球蛋白亞類 - IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1、IgA2

- 大鼠免疫球蛋白亞類 - IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c

- 倉鼠免疫球蛋白亞類 - IgG1、IgG2、IgG3

- 輕鏈 - Kappa、Lambda

- 重鏈 - IgG（γ）、IgM（μ）、IgA（α）、IgD（δ）、IgE（ε）

您的二抗應針對您的樣本物種進行交叉吸附（也稱為預吸附）

為了最大限度地減少二抗的非特異性、背景結合和交叉反應性，我們建議選擇針對樣品來源的物種進行交叉吸附/預吸附的二抗。
例如，如果你的樣品是人體組織，選擇一種交叉吸附了人體免疫球蛋白（Ig）或血清蛋白（SP）的二抗。這將有助于確保你的二抗對人體組織的交叉反應最小。

在某些情況下，您可能需要考慮使用抗體片段（F(ab')2或Fab）

除了全分子二抗，還生產僅含F（ab’）2或Fab片段的二抗。二抗片段在特定情況下是有用的，包括：

免疫組織化學或類似的檢測，其中二抗需要滲透到組織中。由于其較小的尺寸，F(ab')2 和 Fab 二抗可以比完整的分子抗體更深地滲透到組織中。

含有 Fc 受體的樣本。由于 F(ab')2 和 Fab 二抗缺乏 Fc 區域，它們的使用可以減少含有 Fc 受體的樣本中的非特異性結合和背景。

選擇與您的分析和檢測技術兼容的結合物

檢測二抗有許多不同的方法，根據檢測技術選擇綴合物。對于western blotting和ELISA應用，通常使用酶偶聯二抗，如辣根過氧化物酶（HRP）和堿性磷酸酶（AP），兩者都可以使用比色法和化學發光平臺進行檢測。也有板閱讀器和成像儀，可以檢測共軛到熒光染料的二次（例如，Alexa Fluor?，FITC， TRITC， APC， PE）。

對于流式細胞術或免疫熒光應用，需要與熒光染料偶聯的二抗。

了解我們的二抗命名系統

在 SouthernBiotech，我們的二抗命名方式為您提供了在選擇二抗時需要了解的關鍵信息。

SouthernBiotech 擁有大量現成二抗，將使您的檢測順利進行，項目按計劃進行。

以支持您的研究成功。如果您沒有看到所需的二抗，我們的定制服務團隊可以為您制作單克隆和多克隆二抗，并將其與您的檢測所需的檢測分子結合。