生物素偶聯試劑盒應用示例&FAQ

生物素偶聯試劑盒背景：

生物素是一種水溶性B族維生素，分子量為244Da，由一個脲環與四氫噻吩環稠合而成。戊酸取代基連接到四氫噻吩環的一個碳原子上。生物素與阿維丁或鏈親和素具有很高的親和力，因此生物素-阿維丁系統作為一種多級信號放大系統，廣泛應用于免疫檢測，具有高靈敏度和強特異性。

FlyLink? 生物素標記試劑盒設計用于直接從含有活性氨基的蛋白質、肽和其他配體制備生物素偶聯物。我們試劑盒中提供的生物素已被預激活，可直接用于偶聯。FlyLink? 生物素標記試劑盒包含用于制備生物素標記分子的現成組件。

艾美捷生物素偶聯試劑盒：

Cat #: D-AKE120

Size: 100 μg x 3

Storage: Stored at 4°C for 6 months, protected from light

AP偶聯試劑盒應用示例：

直接標記的一級抗體是有利的，因為它們消除了免疫測定程序中對二級試劑的需求，從而消除了ELISA和Western印跡等應用中繁瑣的額外培養和洗滌步驟。

圖：原理圖FlyLink? 生物素標記試劑盒示意圖

適用樣品：

標記生物分子，特別是蛋白質、肽和其他含有游離氨基的配體

生物素偶聯試劑盒FAQ：

Q1：濃縮后，樣品濃度仍低于2 mg/mL？

A1：如果濃縮后樣品濃度仍低于2 mg/mL，則可以適當調整標記系統的體積，但最終濃度應大于1 mg/mL。步驟（1）中生物素標記溶液的體積應為標記系統體積的10%。在步驟（2）中，可以不加入去離子水，并且活性生物素溶液的體積保持不變。你也可以根據自己的實驗做出適當的調整。

Q2：如何針對待標記樣品的不同分子量選擇合適的純化柱？

A2：純化的柱適用于分子量為100KD至200KD的樣品。如果樣品的分子量大于200KD或小于100KD，則最好配備更合適的純化柱尺寸。

Q3：待標記樣品的分子量是否與生物素相似？

A3：如果樣品的分子量與生物素相似，在完成本說明書對應的標記步驟后，加入30μL 0.5μM NH4Cl，在37°C下孵育10分鐘，以猝滅游離的生物素，而無需純化步驟。

Q4：不同分子量的分子有不同的耦合效應嗎？

A4：對于分子量小于5KD的分子，偶聯效果較差。你可以適當地增加分子的數量。

*該試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

Biogradetech全球生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。