脂肪酸合成酶 (FAS) 活性檢測試劑盒的結果分析和數據解讀

脂肪酸合酶（FAS）是脂肪酸合成中的關鍵酶，催化乙酰輔酶A和馬來酰輔酶A生成長鏈脂肪酸。FAS廣泛表達于各種組織和細胞中，在哺乳動物的肝臟、腎臟、腦、肺、乳腺和脂肪組織中豐富存在。EZMeta?脂肪酸合酶（FAS）比色活性檢測試劑盒提供了一種方便的工具，用于檢測FAS活性。其原理是FAS催化乙酰輔酶A、馬來酰輔酶A和NADPH生成長鏈脂肪酸和NADP+。NADPH在340 nm處具有特征性吸收峰，而NADP+則沒有。通過檢測340 nm處吸光度的下降速率來計算FAS的酶活性。

艾美捷 脂肪酸合成酶 (FAS) 活性檢測試劑盒：

編號：D-AKC2240

規格：48T / 96T

儲存：在-20°C下儲存6個月

適用樣品：血清、血漿、動物和植物組織、細胞、細菌

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性檢測試劑盒提供的材料和儲存條件：

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性檢測試劑盒所需材料（但不包括在內）：

· 可測量340 nm處吸光度的微孔板讀取器或紫外可見分光光度計

· 96孔UV板或微石英比色皿、精密移液器、一次性移液頭

· 冰制造機、冷藏離心機、培養箱

· 去離子水

· 均質器（用于組織樣本）

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性檢測試劑盒試劑準備：

提取緩沖液：按照提供的狀態直接使用。在使用前一天取出，放在4°C解凍并徹底混合。使其與室溫平衡。儲存在-20°C。測定緩沖液：按照提供的狀態直接使用。在使用前使其與室溫平衡。儲存在4°C。NADPH：為96孔加入1.64 mL測定緩沖液，為48孔加入0.82 mL測定緩沖液，溶解后使用。此溶液可以分裝后儲存在-20°C，以避免反復凍結和解凍。乙酰輔酶A：為96孔加入0.44 mL測定緩沖液，為48孔加入0.22 mL測定緩沖液，溶解后使用。此溶液可以分裝后儲存在-20°C，以避免反復凍結和解凍。馬來酰輔酶A：為96孔加入0.84 mL測定緩沖液，為48孔加入0.42 mL測定緩沖液，溶解后使用。此溶液可以分裝后儲存在-20°C，以避免反復凍結和解凍。工作試劑：為一個孔準備180 ?L工作試劑，加入16 ?L溶解的NADPH，4 ?L溶解的乙酰輔酶A，8 ?L溶解的馬來酰輔酶A和152 ?L測定緩沖液。使用前制備工作試劑，根據需要量進行調配。

脂肪酸合成酶 (FAS) 活性檢測試劑盒樣品制備：

注意：推薦使用新鮮樣品，如果不立即檢測，樣品可以在-80°C下儲存一個月。

1. 動物組織：稱取0.1 g組織，加入1 mL提取緩沖液，在冰上均質。在4°C下以12,000 g離心40分鐘。使用上清液進行檢測，并將其放在冰上進行測試。

2. 植物組織：稱取0.1 g組織，加入1 mL提取緩沖液并研磨。在冰浴中超聲波處理5分鐘（功率20%或200 W，超聲波3秒，間隔7秒，重復30次）。在4°C下以12,000 g離心40分鐘。使用上清液進行檢測，并將其放在冰上進行測試。

3. 細胞或細菌：收集5×10^6個細胞或細菌到離心管中，用冷PBS洗滌細胞或細菌，離心后棄去上清液；加入1 mL提取緩沖液，在冰浴中超聲波處理5分鐘（功率20%或200 W，超聲波3秒，間隔7秒，重復30次）。在4°C下以12,000 g離心40分鐘。使用上清液進行檢測，并將其放在冰上進行測試。

4. 血清、血漿或其他液體樣品：直接進行檢測。

注意：對于脂肪含量較高的動物組織，在離心后去除上層脂肪，然后取上清液。如果通過蛋白濃度計算含量，最好使用EZMeta?脂肪酸合酶（FAS）比色活性檢測試劑盒來量化總蛋白質。

該試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途