組織無機磷含量檢測試劑盒數據分析和儲存條件說明

無機磷主要指無機磷酸鹽基團，它參與生物體的各種代謝過程，包括能量代謝、核酸代謝、蛋白質磷酸化和脫磷酸化，并且還可以促進碳水化合物的合成、轉化和運輸。銨鉬酸鹽與無機磷酸鹽反應形成一種在660 nm處具有特征吸收峰的物質。通過測量在660 nm處的吸光度，可以計算出無機磷的含量。

艾美捷組織無機磷含量檢測試劑盒：

貨號：D-AKC2170

規格：96孔板

儲存條件：儲存在4°C下，避光，保存12個月

適用樣品：動物和植物組織

提供的材料和儲存條件：

試劑制備：

試劑I：直接使用，使用前使其恢復至室溫。儲存在4°C。

試劑II：直接使用，使用前使其恢復至室溫。儲存在4°C。

試劑III：使用前需準備，加入2 mL去離子水并充分溶解。儲存在4°C，避光。

試劑IV：使用前需準備，加入8 mL去離子水并充分溶解。儲存在4°C，避光。

磷固定液：按照去離子水：試劑II：試劑III：試劑IV=10：5：2：8的比例準備（請根據實際需要準備），并在同一天使用。

標準品：直接使用，使用前使其恢復至室溫。儲存在4°C。

樣品制備：

1、組織樣品：稱取0.1克組織，加入1 mL試劑I并在冰上均質化（組織質量（克）：試劑I體積（mL）為1:10）。在4°C下以10,000 g離心10分鐘。使用上清液進行分析，并將其放在冰上進行測試。

程序分析：

1. 預熱微孔板讀取器或可見光分光光度計超過30分鐘，并將波長調整為660 nm，可見光分光光度計使用去離子水歸零。

2. 操作臺（在1.5 mL離心管中進行）：

3. 混合后，將其放入40°C的水浴中加熱10分鐘，室溫冷卻10分鐘，取200 μL上清液加入可見光分光光度計或96孔板中，然后在660 nm處測量吸光度。空白孔、標準孔和測試孔的吸光度分別記錄為ABlank、AStandard和ATest。最后，計算ΔATest=ATest-ABlank，ΔAStandard=AStandard-ABlank。

注意：空白孔和標準孔只需測量1次。為保證實驗結果的準確性，需要進行2-3個樣品的預實驗。適當增加樣品數量。如果ΔATest大于1.0，可以使用試劑I適當稀釋樣品，將計算結果乘以稀釋倍數，或適當減少樣品數量。

數據分析：

注意：計算公式，包括推導過程和最終公式。兩者完全相等。建議使用加粗的簡潔計算公式作為最終公式。

（1）按蛋白質濃度計算

無機磷含量（μmol/mg蛋白）=（C標準×ΔATest÷ΔA標準）×V總 ÷ Cpr = 1×ΔATest÷ΔA標準÷Cpr

（2）按樣品新鮮重量計算

無機磷含量（μmol/g新鮮重量）=（C標準×ΔATest÷ΔA標準）×V總÷W = 1×ΔATest÷ΔA標準÷W

C標準：1 mmol/L；V總：上清液總體積，1 mL = 0.001 L；W：樣品重量，克

該試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途。