EZElisa三碘甲狀腺原氨酸(T3) ELISA試劑盒檢測原理

三碘甲狀腺原氨酸（T3）是診斷甲狀腺功能減退和甲狀腺功能亢進的有用標志物。T3水平在甲狀腺功能減退患者中降低，在甲狀腺功能亢進患者中增加。T3的產生受到來自垂體前葉釋放的甲狀腺刺激素（TSH）的激活。這條途徑是閉環反饋過程的一部分：血漿中T3濃度升高會抑制垂體前葉的TSH產生。隨著這些激素濃度的降低，垂體前葉增加TSH的產生，通過這些過程，反饋控制系統穩定了血液中的甲狀腺激素水平。EZElisa?游離三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒采用競爭性抑制酶免疫測定技術。試劑盒中的微孔板已經預包被了特異性抗T3抗體。將標準品或樣品加入到適當的微孔板孔中，加入與生物素偶聯的T3。T3（標準品或樣品）與預包被的特異性抗T3抗體結合的生物素偶聯的T3之間發生競爭性抑制反應。樣品中T3的含量越高，與生物素偶聯的T3結合的抗體越少。洗滌后，加入過氧化物酶標記的親和素（Avidin-HRP）到孔中。加入底物溶液，顏色的發展與樣品中T3的含量相反。停止顏色的發展，并測量顏色的強度。

艾美捷EZElisa三碘甲狀腺原氨酸(T3) ELISA試劑盒基本參數：

目錄號：D-AEK0006

規格：48T/96T

儲存：未開封的試劑盒應在4°C下保存12個月，并避光

檢測范圍：0.5 ng/mL-8 ng/mL

靈敏度：0.4 ng/mL

特異性：EZElisa?游離三碘甲狀腺原氨酸（T3）ELISA試劑盒具有高靈敏度和優異的特異性，可用于T3的檢測。未觀察到T3與類似物之間的顯著交叉反應或干擾。

適用樣本：血清、血漿

供應材料和儲存條件：

Note: Std1: 0.5 ng/mL; Std2: 1 ng/mL; Std3: 2 ng/mL; Std4: 4 ng/mL; Std5: 8 ng/mL.

EZElisa三碘甲狀腺原氨酸(T3) ELISA試劑盒試劑準備：

注意：使用前將所有試劑平衡至室溫。如果緩沖濃縮液中形成了晶體，請輕輕加熱，直到它們完全溶解。

1×洗滌緩沖液：洗滌緩沖液（20×）用去離子水1:20稀釋，得到1×洗滌緩沖器。在4°C下儲存。

樣本制備：

1. 血清：使用血清分離管，在室溫下使樣本凝結30分鐘，然后以1,000 g的速度離心15分鐘。立即取出血清進行檢測，或將樣本分裝并儲存在-20°C。避免反復凍融循環。

2. 血漿：使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝劑收集血漿。在采集后30分鐘內以1,000 g的速度離心15分鐘。立即進行檢測，或將樣本分裝并儲存在-20°C。避免反復凍融循環。注意：不要使用明顯溶血或脂質血癥的標本。如果樣本在24小時內使用，可以儲存在2到8°C。避免反復凍融循環。在檢測前，應緩慢將冷凍樣本回溫至室溫，并輕輕混勻。

程序分析：

1. 從微孔板架上取下多余的微孔板條，放回包含干燥劑包裝袋中，并重新密封。

2. 每個孔加入50 μL的T3標準品或樣品。建議將所有標準品和樣品都以兩個孔的形式加入微孔板中。設置一個空白孔，不加入任何溶液。

3. 每個孔加入50 μL的生物素偶聯的T3（不加入空白孔）。充分混勻，用提供的孔蓋蓋上，然后在37°C下孵育1小時。

4. 倒出每個孔中的液體，并進行洗滌，總共洗滌三次。使用多通道移液器或自動微孔板洗滌器，將每個孔填滿1×洗滌緩沖液（250 μL），靜置10秒鐘，每個步驟完全去除液體對于良好的性能至關重要。最后一次洗滌后，倒轉孔板并用干凈的紙巾輕輕拍干任何剩余的1×洗滌緩沖液。

5. 每個孔加入50 μL的過氧化物酶標記的親和素（Avidin-HRP），充分混勻，用提供的孔蓋蓋上。在37°C下孵育30分鐘。

6. 重復第4步中的洗滌過程。

7. 每個孔加入50 μL的底物A和50 μL的底物B，充分混勻，用提供的孔蓋蓋上。在37°C下孵育15分鐘。將孔板放置在無風和其他溫度波動的暗處。

8. 每個孔加入50 μL的停止溶液。停止溶液應按照過氧化物酶底物的順序加入孔板中?？字械念伾珣獜乃{色變為黃色。如果孔中的顏色是綠色，或者顏色變化不均勻，請輕輕拍打孔板以確保充分混勻。

9. 在30分鐘內使用設置為450 nm的微孔板讀數儀測定每個孔的光密度。

該試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

Biogradetech生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的供應商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。