SPY650-FastAct：用于活細胞快速肌動蛋白動力學成像的遠紅探針

一、產品概述

SPY650-FastAct 是一種熒光發生型遠紅探針，專用于活細胞中快速肌動蛋白動態過程的可視化。該探針由 SPY 染料與化學修飾的天然產物茉莉內酯（jasplakinolide）偶聯而成。茉莉內酯是已知的肌動蛋白結合化合物，經化學優化后，該探針能夠以高特異性和低背景對活細胞中的 F-肌動蛋白進行標記，同時支持快速動態過程的實時成像。

二、核心應用場景

活細胞中快速肌動蛋白動態的可視化：適用于觀察肌動蛋白絲的快速組裝、解聚及重塑過程。

穩定肌動蛋白絲的可視化：也可用于標記相對穩定的肌動蛋白結構。

多色成像兼容：其遠紅發射光譜為與其他顏色熒光標記（如綠色、黃色）聯合使用提供了便利，便于開展多參數細胞成像實驗。

三、材料構成與工作原理

由艾美捷代理，Cytoskeleton推出的SPY650-FastAct 探針（貨號：CY-SC505）由兩部分功能單元組成：

SPY 染料：提供熒光信號，且具有熒光發生特性——僅在結合 F-肌動蛋白時熒光顯著增強，未結合狀態下熒光極弱，從而有效降低背景。

化學修飾的茉莉內酯：作為肌動蛋白結合元件，賦予探針對 F-肌動蛋白的高親和力和特異性。

這種設計使得探針能夠快速結合至肌動蛋白絲，并以高時空分辨率捕捉肌動蛋白的動態行為。

四、關鍵特性

特性 | 描述

激發/發射波長 | Ex: 652 nm, Em: 674 nm（遠紅光譜區）

細胞通透性 | 可穿透活細胞膜，無需透化處理

適用樣本 | 活細胞（不適用于固定細胞）

熒光發生特性 | 結合 F-肌動蛋白后熒光增強，背景極低

成像兼容性 | 支持寬場、共聚焦、SIM（結構光照明顯微鏡）、STED（受激發射損耗顯微鏡）

生物活性驗證 | 在活 HeLa 細胞中驗證了標記肌動蛋白絲及快速動態的能力

五、生物活性測定方法

CY-SC505 探針的生物活性通過其在活 HeLa 細胞培養物中有效標記肌動蛋白絲和捕捉快速肌動蛋白動態的能力進行評估。具體操作建議如下：

1. 快速動態成像：不建議進行洗滌步驟。洗滌會移除未結合的探針，但可能干擾對快速動態過程的連續記錄。為捕捉肌動蛋白的瞬時變化，應保持探針存在于成像培養基中。

2. 長時間延時成像：若需要進行數小時以上的時間序列采集，同樣建議不進行洗滌，將探針持續保留在成像培養基中，以維持穩定的標記信號和動態過程的完整記錄。

六、使用注意事項

該探針專門設計用于活細胞，不推薦用于固定樣本。

由于探針的熒光發生特性，無需額外洗滌即可獲得高信噪比圖像，尤其適合追蹤肌動蛋白的快速重構事件（如細胞運動、分裂、吞噬等）。

遠紅光譜（652/674 nm）可減少對細胞的光毒性，并降低自發熒光干擾，適用于長時間成像實驗。