Svar Life Science-PhiCal高靈敏度測量人類糞便中糞便鈣衛蛋白濃度

PhiCal?檢測是一種定量ELISA，用于測量人類糞便中糞便鈣衛蛋白的濃度，一種中性粒細胞蛋白，是粘膜炎癥的標志。PhiCal?測試可用作體外測試診斷以幫助診斷炎性腸?。↖BD）：克羅恩病和潰瘍性結腸炎，并將IBD與腸易激綜合征區分開來。

艾美捷Svar Life Science-PhiCal（#CPT400）檢測原理：

PhiCal?糞便鈣衛蛋白免疫測定是一種酶聯免疫吸附測定系統通過比色檢測。該測試使用了一種針對鈣衛蛋白的多克隆抗體，該抗體與一種酶連接免疫吸附測定系統。稀釋樣品中存在的鈣衛蛋白被吸附的抗體結合到塑料井的表面。酶偶聯抗體與捕獲的抗原結合隨后，酶催化底物轉化為有色產物。強度顏色與結合的共軛物的量成正比，因此與捕獲的鈣衛蛋白的量成比例。使用提供的標準計算樣品中鈣衛蛋白的濃度。

Svar Life Science-PhiCal試劑盒包含的試劑：

抗體涂層板：12條條帶，每條帶8個孔，涂有針對鈣保護蛋白的抗體。該板存放在密封袋中，并附有干燥劑。

結合物：15毫升堿性磷酸酶標記的免疫親和純化IgG抗體（來自兔子），針對鈣保護蛋白，溶解在含Proclin 300作為防腐劑的緩沖液中。

底物：1瓶含有15毫升底物的緩沖液。隨時可用。

洗滌液：50毫升20倍濃縮液，需要用蒸餾水稀釋。

稀釋液：20毫升10倍濃縮液，含Proclin 300作為防腐劑，需要用蒸餾水稀釋。

提取液：2瓶50毫升的2.5倍濃縮液，含Proclin 300作為防腐劑，需要用蒸餾水稀釋。該濃縮液對眼睛和皮膚有刺激性。

校準品：5瓶各含1毫升已知濃度的鈣保護蛋白溶液（6.25、12.5、25、50和100 ng/ml），含Proclin 300作為防腐劑。每個標準的值印刷在瓶標簽上。

對照品：含Proclin 300作為防腐劑。

對照品1（低濃度）：1瓶含有1.0毫升。隨時可用。請勿稀釋。該批次的特定范圍值印刷在瓶標簽上，以ng/ml表示。近似范圍 = 20-40 ng/ml 或（50-100 ?g/g）。

對照品2（高濃度）：1瓶含有1.0毫升。隨時可用。請勿稀釋。該批次的特定范圍值印刷在瓶標簽上，以ng/ml表示。近似范圍 = 45-75 ng/ml 或（112.5-187.5 ?g/g）。

性能特征

水相線性：

水相線性通過稀釋Calprotectin參考材料（來自挪威奧斯陸的Magne Fagerhol博士）進行測試。對每個稀釋水平進行了三次重復測量。每個水平的平均觀察值與相應的預期值進行比較，如下圖所示。水相線性的評估表明，該檢測在6.25 - 100 ng/ml或15.625 - 250 ?g/g范圍內具有可接受的線性和準確性。這項研究還作為第二源標定驗證，因為用于標定的標準隨試劑盒提供，而用于評估線性的標準則是稀釋的純化第二源材料。

功能靈敏度：

功能靈敏度（FS）與線性數據一起確定了結果準確和精確的最低濃度；低于檢測的功能靈敏度的患者結果報告為<FS。為了確定PhiCal?測試的功能靈敏度，使用試劑盒標準品的3個濃度（12.5 ng/ml，6.25 ng/ml，3.125 ng/ml）在6天內進行了三次或四次的測定；通過使用稀釋緩沖液將6.25 ng/ml的標準品稀釋獲得3.125 ng/ml水平。每個水平的%CV與其相應的濃度進行繪圖。對于測定的濃度3.125 ng/ml，6.25 ng/ml和12.5 ng/ml的準確性和精確性是可接受的?？蓤蟾娣秶鷮⑹芟抻谧畹托手担?.25 ng/ml。

在典型的樣本稀釋比例為1：2500的情況下，6.25 ng/ml相當于每克糞便中的15.6（?g Calprotectin）/（g stool）。

Svar Life Science-PhiCal文獻參考：

1. Fagerhol MK, et al. Calprotectin (The L1 leukocyte protein) in: Smith V.L. and Dedman J.R. (eds.): Stimulus response coupling: The role of intracellular calcium-binding proteins. CRC Press, Boca Raton 1990,p.187-210

2. R?seth AG, et al. Assessment of the neutrophil dominating protein calprotectin in feces. A methodologic study. Scand J Gastroenterol 1992;27:793-798.

3. R?seth AG, et al. Correlation between faecal excretion of Indium-111-labelled granulocytes and

calprotectin, a granulocyte marker protein, in patients with inflammatory bowel disease. Scand J

Gastroenterol 1999;34:50-54.

4. Tibble J, et al. A simple method for assessing intestinal inflammation in Crohn’s disease. Gut 2000;47:506-513.

5. Bunn SK, et al. Fecal calprotectin: Validation as a noninvasive measure of bowel inflammation in childhood inflammatory bowel disease. J Pediatr Gastroenterol Nutr 2001;33:14-22

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