CD40:CD40L TR-FRET檢測測定原理說明

CD40是一種主要表達在B細胞、單核細胞、巨噬細胞和某些樹突細胞表面的共刺激分子。它通過與CD40配體（CD40L，也稱為CD154）結合，發揮其生物學功能，主要參與免疫應答的調節，特別是在T細胞依賴的B細胞激活和抗體產生過程中。

CD40-CD40L的相互作用是免疫系統中一個關鍵的信號通路，它促進B細胞的增殖、分化和存活，同時增強抗體的類別轉換。此外，CD40信號還參與樹突細胞和巨噬細胞的成熟過程，從而影響T細胞的激活和整個適應性免疫反應。

CD40在多種疾病的發病機制中扮演著角色，包括自身免疫疾病、炎癥性疾病和某些類型的癌癥。例如，在某些自身免疫疾病中，CD40信號的異常激活可能導致B細胞功能失調，進而產生自身抗體。

鑒于CD40在免疫調節中的核心作用，它已成為治療某些疾病的潛在靶點。通過靶向CD40或其配體的生物制劑，可以調節免疫反應，治療如風濕性關節炎、系統性紅斑狼瘡等自身免疫疾病。

CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒旨在測量CD40（分化簇40）與CD40L（CD40配體）的結合活性，用于使用TR-FRET（時間分辨熒光共振能量轉移）進行篩選和分析應用。它使用鋱標記的供體和標記的受體來完成TR-FRET配對。CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒采用方便的384孔格式，含有足夠的重組生物素化CD40（氨基酸21-193）、重組CD40L（氨基酸116-261）、Tb標記的供體、染料標記的受體和用于384反應的檢測緩沖液。

圖1:CD40:CD40L TR-FRET檢測試劑盒示意圖

將含有鋱標記供體、染料標記受體、CD40、CD40L和抑制劑的樣品孵育90分鐘。然后使用熒光閱讀器測量熒光強度。在CD40與CD40L結合的情況下，由于供體和受體的接近，會發生能量轉移。結合的破壞導致能量傳遞的減少。λ=665 nm處的熒光強度直接對應于CD40與CD40L的結合。

艾美捷CD40:CD40L TR-FRET檢測：

貨號：BPS-79258

同義詞：T細胞抗原Gp39，腫瘤壞死因子相關激活蛋白，TRAP，腫瘤壞死因子配體超家族成員5，TNFSF5，CD154，CD40，CD40分子

試劑盒格式：TR-FRET（時間分辨熒光共振能量轉移）

物種：人類

提供形式：該試劑盒以方便的384孔格式提供。

未提供的必需材料：

能夠測量時間分辨熒光共振能量轉移（TR-FRET）的熒光微孔板閱讀器

可調節的微量移液器和無菌吸頭

UniProt #CD40: P25942; CD40L: P29965

存儲/穩定性：如果按照指示存儲材料，該試劑盒在收到日期起的6個月內將表現最佳。

使用說明：詳見試劑盒數據表的詳細協議

應用：

研究酶動力學。

在高通量篩選（HTS）應用中篩選小分子抑制劑。

運輸溫度：-80°C

CD40:CD40L TR-FRET檢測文獻參考：

Annis A., et al., 2004 J. Amer. Chem. Soc. 126(4): 15495-15503.

Yan, T., et al., 2001 J. Cellular Biochem. 83(2): 320-325.

Tang T., et al., 2021 Pharmacol The 219:107709.

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