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特色產品在生命科學的研究中,蛋白質的翻譯后修飾(PTMs)是理解細胞功能和疾病機制的關鍵。其中,S-硝基化(S-nitrosylation)作為一種重要的可逆共價修飾,廣泛存在于多種生理和病理過程中,如神經退行性疾病、心血管疾病以及炎癥反應等。為了更高效地檢測這種修飾,由艾美捷代理Cayman公司推出的 S-Nitrosylated Protein Detection Kit (Biotin Switch) 成為科研人員不可或缺的工具。
一、產品簡介
本產品名稱為 S-Nitrosylated Protein Detection Kit (Biotin Switch),貨號為 CAY-10006518-1。該試劑盒基于經典的“生物素開關”(Biotin Switch)技術,能夠高效、特異性地識別和富集S-硝基化的蛋白質,為研究人員提供了一種快速、可靠的檢測手段。
二、技術原理與優勢
“Biotin Switch”技術的核心在于利用生物素標記的探針,對S-硝基化的半胱氨酸殘基進行選擇性捕獲。其過程包括以下幾個關鍵步驟:
1. 還原S-硝基化蛋白:首先,使用還原劑將S-硝基化蛋白中的硝基基團還原為游離的硫醇基團。
2. 生物素標記:隨后,通過化學反應將生物素標記物連接到這些被還原的硫醇基團上。
3. 富集與檢測:最后,利用抗生物素蛋白(如鏈霉親和素)從復雜樣品中富集帶有生物素標記的S-硝基化蛋白,并通過Western blot或質譜等方法進行分析。
相比傳統方法,Biotin Switch技術具有以下顯著優勢:
高靈敏度:可以檢測低至皮克級的S-硝基化蛋白,適用于各種組織和細胞樣本。
高特異性:僅針對S-硝基化修飾的半胱氨酸,避免了非特異性結合帶來的干擾。
操作簡便:試劑盒包含所有必需試劑和詳細操作指南,無需復雜的設備或專業技能即可完成實驗。
適用性強:適用于多種研究模型,包括細胞裂解液、組織勻漿、體液等。
三、應用領域
S-硝基化蛋白的檢測在多個研究領域中具有重要意義。例如:
神經系統疾?。篠-硝基化在阿爾茨海默病、帕金森病等神經退行性疾病中發揮重要作用,相關研究有助于揭示發病機制。
心血管系統:一氧化氮(NO)介導的S-硝基化在血管調節、心肌功能等方面具有重要調控作用。
免疫與炎癥:S-硝基化參與調控炎癥因子的活性,影響免疫細胞的功能與信號傳導。
藥物開發:了解S-硝基化在藥物靶點中的作用,有助于新型藥物的設計與優化。
四、產品特點
S-Nitrosylated Protein Detection Kit (Biotin Switch) 憑借其卓越的技術性能和便捷的操作流程,成為眾多實驗室的首選工具。以下是其主要特點:
高質量試劑:由Cayman公司嚴格生產,確保每一批次產品的穩定性和可靠性。
全面配套:試劑盒內含所有必要的試劑,包括還原劑、生物素標記物、洗脫液、Western blot專用抗體等。
標準化流程:提供詳細的實驗步驟和注意事項,便于不同實驗室之間的結果對比與重復。
支持多平臺應用:既可用于Western blot,也可用于質譜分析,滿足不同研究需求。
五、實驗建議與注意事項
盡管該試劑盒操作簡便,但在實際應用中仍需注意以下幾點:
樣本處理:建議使用新鮮或凍存的組織或細胞,避免反復凍融以減少蛋白降解。
試劑保存:未使用的試劑應按照說明書要求低溫保存,以保持活性。
實驗條件控制:還原和標記反應的時間、溫度等參數需嚴格控制,以保證檢測準確性。
數據驗證:建議結合其他檢測方法(如質譜或免疫熒光)進行結果驗證,提高結論的可信度。

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