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C-BSM583快速內切酶XhoI解決方案

發布者:艾美捷科技    發布時間:2023-09-08     
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快速內切酶,可在5~15 min內完成反應,最適反應溫度為37℃,受CpG甲基化影響,序列完全重疊,剪切受阻,失活條件為80℃溫育20 min,3 h溫育未表現星號活性,延時酶切可能出現星號活性。

 

艾美捷快速內切酶XhoI

Cat #: C-BSM583

Size: 500 rxns

Storage: -20°C

 

快速內切酶XhoI組成:

Components Amount

FlyCut?"  Xhol 500μl

10x CutOne' Buffer 3x1 ml

10x CutOne' Color Buffer 3×1 ml

 

使用方法:

1.快速DNA消化方案

①將以下反應組分按所示順序在冰上混合:

快速內切酶XhoI


對于純化的PCR產物。如果PCR產物未純化,則10×CutOne的量? 緩沖液應減少到2μl,以減少未純化的PCR產物中剩余的金屬離子。我們建議在消化用于克隆之前純化PCR產物,因為一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能會改變切割DNA的末端。

②輕輕攪拌并向下旋轉;

③在37°C下培養15分鐘(質粒DNA)或15~30分鐘(PCR產物)或30~60分鐘(基因組DNA);

④ 可選:在80°C下加熱20分鐘使酶失活;

⑤如果CutOne? 在反應中使用顏色緩沖液,將反應混合物的等分試樣直接裝入凝膠中。

2.DNA的雙重和多重消化

① 使用每種酶1μl,并適當擴大反應條件;

② 反應混合物中酶的總體積不應超過總反應體積的1/10;

③如果酶需要不同的反應溫度,從需要較低溫度的酶開始,然后加入第二種酶并在較高溫度下孵育。

3.擴大質粒DNA消化反應


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