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特色產品快速內切酶,可在5~15 min內完成反應,最適反應溫度為37℃,受CpG甲基化影響,序列完全重疊,剪切受阻,失活條件為80℃溫育20 min,3 h溫育未表現星號活性,延時酶切可能出現星號活性。
艾美捷快速內切酶XhoI:
Cat #: C-BSM583
Size: 500 rxns
Storage: -20°C
快速內切酶XhoI組成:
Components Amount
FlyCut?" Xhol 500μl
10x CutOne' Buffer 3x1 ml
10x CutOne' Color Buffer 3×1 ml
使用方法:
1.快速DNA消化方案
①將以下反應組分按所示順序在冰上混合:

對于純化的PCR產物。如果PCR產物未純化,則10×CutOne的量? 緩沖液應減少到2μl,以減少未純化的PCR產物中剩余的金屬離子。我們建議在消化用于克隆之前純化PCR產物,因為一些DNA聚合酶的核酸外切酶活性可能會改變切割DNA的末端。
②輕輕攪拌并向下旋轉;
③在37°C下培養15分鐘(質粒DNA)或15~30分鐘(PCR產物)或30~60分鐘(基因組DNA);
④ 可選:在80°C下加熱20分鐘使酶失活;
⑤如果CutOne? 在反應中使用顏色緩沖液,將反應混合物的等分試樣直接裝入凝膠中。
2.DNA的雙重和多重消化
① 使用每種酶1μl,并適當擴大反應條件;
② 反應混合物中酶的總體積不應超過總反應體積的1/10;
③如果酶需要不同的反應溫度,從需要較低溫度的酶開始,然后加入第二種酶并在較高溫度下孵育。
3.擴大質粒DNA消化反應
Biogradetech全球生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商:Biogradetech成立于2015年,總部位于美國加利福尼亞州,早期以產品技術研發服務起家,逐步發展了廣泛的產品線,并將其商業化銷售,包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。

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