快速內切酶ClaI：能夠在5~15分鐘內消化DNA

快速內切酶ClaI是一系列能夠快速消化DNA的工程限制性酶。所有快速內切酶ClaI在通用CutOne中顯示出優異的活性? 和CutOne? 彩色緩沖液，能夠在5~15分鐘內消化DNA。這使得任何限制性酶的組合都能在一個反應管中同時工作，并消除了連續消化的需要?？焖賰惹忻窩laI已通過多項嚴格的質量控制，可用于消化質粒、基因組和病毒DNA以及PCR產物。CutOne? Color Buffer包括密度試劑以及紅色和黃色跟蹤染料，可以將反應混合物直接裝載在凝膠上。CutOne的紅色染料? 彩色緩沖液在1%瓊脂糖凝膠中與2.5kb雙鏈DNA片段一起遷移，黃色染料在1%瓊脂凝膠中與10bp雙鏈DNA碎片一起遷移。

艾美捷快速內切酶ClaI：

Cat #: C-BSM532

Size: 50 rxns

Storage: -20°C

快速內切酶ClaI組成：

推薦反應條件：

1xCutOne“緩沖液；在37°C下培養；

熱滅活

在80°C下培養20分鐘。

質量控制：

功能測試

在含有1μgλDNA（Dam）和1μl FlyCut“”Clal的CutOne“”緩沖液中，在37℃下孵育15分鐘，反應20μl，瓊脂糖凝膠電泳測定完全消化。

長時間培養/星形活性測定

在含有1μgλDNA（Dam）和1μl FlyCut“”Clal的CutOne“”緩沖液中，在37℃下孵育3小時，反應20μl，通過瓊脂糖凝膠電泳測定，結果是DNA模式沒有可檢測的核酸酶降解。較長的孵育時間可能導致星形活性。

結扎和清算

在37°C下用FlyCut“Clal消化10倍后，在22℃下，>95%的DNA片段可以與T4 DNA連接酶連接。在這些連接的片段中，通過瓊脂糖凝膠電泳測定，>95%可以用FlyCut”“Clal重新切割。

非特異性核酸內切酶活性

在含有1μg超螺旋質粒和1μl FlyCut“”Clal的CutOne“”緩沖液中，在37℃下孵育4小時，反應20μl，通過瓊脂糖凝膠電泳測定，轉化為刻痕或線性形式的轉化率<10%。

藍白篩選法：

1μl FlyCut酶切lacZα基因載體? ClaI。將酶解產物連接并轉化為大腸桿菌感受態細胞。在含有X-Gal、IPTG和適當抗生素的Luria Bertani培養板上，成功連接的β-半乳糖苷酶基因可以表達并產生藍色菌落，而中斷基因（即降解的DNA末端）產生白色菌落。飛剪? 限制性內切酶必須產生少于1%的白色菌落。