高品質肽N-糖苷酶 F（His標簽）介紹

背景：

PNGase F（肽 N- 糖苷酶 F）來源于 Elizabethkingia miricola，是一種高效的酰胺水解酶，可以裂解由天冬酰胺接的高甘露糖、雜合和復雜的寡糖糖蛋白。PNGase F 的切割位點為糖蛋白內側 N- 乙酰葡萄糖胺（GlcNAc）和天冬酰氨殘基之間的酰胺鍵，同時將酶解后蛋白上的天冬氨酰轉化為天冬氨酸。

艾美捷肽N-糖苷酶 F（His標簽）：

Cat #: C-BSM3303

Size: 15000 U / 75000 U

Storage: -20°C

肽N-糖苷酶 F（His標簽）組分：

酶活性定義：

一個單位（U）的酶活性是指在10μl反應系統中，在37°C下1小時，從10μg變性RNase B中去除95%以上的碳水化合物所需的酶量。

滅活條件：

在75°C下培養10分鐘。

質量控制

蛋白質純度檢測：

產品經SDS-PAGE檢測，純度≥95%。糖苷酶和蛋白酶活性檢測：

沒有可檢測的內切糖苷酶F1、F2或F3活性；沒有可檢測的蛋白酶活性。

使用說明：

1.在變性條件下的脫糖基化：

① 將1-20μg糖蛋白、1μl 10×變性緩沖液和ddH20（如有必要）混合至總體積為10μl。

注：10倍變性緩沖液在低溫下儲存時可能會有白色沉淀。使用前在37°C下培養即可溶解。

② 在100°C下孵育10分鐘，使糖蛋白變性，然后在冰上冷卻并離心10秒。

③加入2μl 10×PNGase F緩沖液，2μl 10%NP-40，并補充ddH20，使總反應體積為20μl。④加入1-2μl PNGase F，輕輕攪拌，在37℃下孵育1-3小時。

2.在非變性條件下的脫糖基化：

① 將1-20μg糖蛋白、2μl 10×PNGase F緩沖液和ddH20（如有必要）混合至總體積為20μl。

② 加入2-5μl PNGase F，輕輕混合。

③ 在37°C下培養4-24小時。

PNGase F的去除：

該產物含有His標簽，反應后，PNGase F可以通過親和層析從靶糖蛋白中使用不同的標簽去除。

本試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

Biogradetech是生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的領先供應商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。