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T7 RNA聚合酶的兩種類型和適用范圍

發布者:艾美捷科技    發布時間:2023-09-29     
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T7 RNA 聚合酶是一種依賴 DNA 的 RNA 聚合酶,其對噬菌體 T7 啟動子序列有高特異性。該酶從 T7 啟動子插入到轉錄載體下游的 DNA 上合成大量 RNA??色@取 T7 RNA 聚合酶技術公告。

 

應用:標記和未標記的 RNA 轉錄本的合成。

 

來源:從在質粒上表達 T7 RNA 聚合酶基因的大腸桿菌純化獲得。

 

性能和質量檢驗:3? 和 5? 脫氧核糖核酸外切酶、核糖核酸酶和 DNA 缺口檢測;

轉錄反應中的性能。

 

T7 RNA聚合酶類型:

常規型和耐熱型。常規型T7 RNA聚合酶可在37℃對模板進行高效體外轉錄,而耐熱型T7 RNA聚合酶可在更高的溫度下進行體外轉錄。基于此耐熱的體外轉錄反應特性具有以下優勢:

1.提升了GC含量較高RNA的轉錄效率;

2.提升了長片段RNA的合成能力;

3.在使用帽類似物時,提高了共轉錄的加帽效率;

4.減少了dsRNA 副產物的形成,降低了合成RNA的免疫原性。

 

艾美捷T7 RNA聚合酶:

英文名字:T7 RNA Polymerase

貨號:C-BSM0124

規格:5000 U / 25000 U

組成:T7 RNA Polymerase (50 U/μl)/10×T7 RNA Polymerase Buffer

純度:SDS-PAGE檢測結果大于95%。

核內殘留物:將20 U T7 RNA聚合酶與超螺旋質粒DNA在37°C下孵育4小時,DNA電泳未檢測到質粒的變化

殘留DNA酶:將T7 RNA聚合酶與雙鏈DNA在37°C下孵育16小時,DNA電泳未檢測到DNA變化。

RNase殘基:將T7 RNA聚合酶與RNA在37°C下孵育1小時,電泳中未檢測到RNA降解

 

T7 RNA聚合酶適用范圍:

1. 合成單鏈 RNA,包括 mRNA,siRNA,gRNA 等各類 RNA 的前體。

2. 合成標記或未標記的高特異性 RNA 探針。

3. 利用帽子類似物合成加帽的 mRNA。

 

推薦的反應條件:

在37°C下培養1小時。如果轉錄物長度小于300nt,反應時間可以延長至2-16小時。反應結束后,在上述20μl反應混合物中加入1μl雙脫氧核糖核酸酶,并在37°C下孵育15分鐘以移動DNA模板


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