Bovine lgA ELISA--高效測量牛生物樣品中的IgA

Bovine lgA ELISA試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于測量牛生物樣品中的IgA。如果ELISA在預期用途之外使用，用戶可能需要對所述用途進行優化。

僅用于研究。非診斷用途。僅限體外使用。

當按照包裝內說明書中的信息完全理解并遵循實驗程序，以及遵守良好的實驗室操作規范時，將獲得可靠和可重復的結果?？赡苡绊憣嶒炐阅艿囊蛩匕▋x器功能、玻璃器皿的清潔度、蒸餾水或去離子水的質量、試劑和樣品移液的準確性、洗滌技術、孵化時間和溫度。不要將不同批次或來源的試劑混合或替換使用。

艾美捷Bovine lgA ELISA試劑盒（E-10A）組件：

試劑盒及其組件的有效期標注在盒標簽上。如果按照本試劑盒的協議插入說明進行存儲和使用，所有組件都應保持穩定直至有效期。

Bovine lgA ELISA樣本收集和處理：

所有血液成分和生物材料應被視為潛在的危險物質進行處理。在處理和處置時遵循通用預防措施。如果血液樣本出現凝固、明顯溶血、脂血，或者樣本的完整性受到懷疑，請做記錄并謹慎解釋結果。

下面列出的樣本收集和儲存條件旨在作為一般指南。樣本的穩定性尚未評估。

血清樣本：應通過靜脈穿刺采集血液。血液凝固后，應通過離心分離血清。取出血清后立即檢測，或分裝并儲存于-80°C（Z好）或-20°C。避免反復凍融。

血漿樣本：Z應將血液收集到含有抗凝劑的容器中，然后進行離心。立即檢測或分裝并儲存于-80°C（好）或-20°C。避免反復凍融。

尿液樣本：使用無菌或清潔的尿液收集器收集中段尿液。離心以去除細胞碎片。立即檢測或分裝并儲存于-80°C（Z好）或-20°C。避免反復凍融。

已知干擾物質：高于0.1%濃度的疊氮化物和硫柳汞會抑制酶反應。

Bovine lgA ELISA檢測程序：

1. 所有樣本和標準品都應以雙份進行檢測。

2. 應盡快將標準品和待測樣本（s）裝入ELISA孔中，以避免吸光度（OD）讀數的偏移。使用多通道移液管可以減少這種情況的發生。將以下標準品和樣本以雙份移液至孔中：

標準品0（0.0 ng/mL）雙份

標準品1（6.25 ng/mL）雙份

標準品2（12.50 ng/mL）雙份

標準品3（25 ng/mL）雙份

標準品4（50 ng/mL）雙份

標準品5（100 ng/mL）雙份

標準品6（200 ng/mL）雙份

標準品7（400 ng/mL）雙份

3. 將100 μL的樣本（雙份）移液至預先指定的孔中。

4. 將微孔板在室溫下孵育六十（60 ± 2）分鐘。孵育期間保持板蓋覆蓋并保持水平。

5. 孵育后，吸去孔中的內容物。

6. 用適當稀釋的洗滌液完全填充每個孔，然后吸去。重復三次，總共進行四次洗滌。如果手動洗滌：用洗滌緩沖液完全填充孔，然后將板倒置，將內容物倒入或搖晃進廢液容器中。接著用力敲擊孔以吸收紙上去除殘留的緩沖液。重復三次，總共進行四次洗滌。

7. 將100 μL適當稀釋的酶-抗體結合物移液至每個孔中。在室溫下暗處孵育二十（20 ± 2）分鐘。孵育期間保持板蓋覆蓋并保持水平。

8. 如步驟5/6所述洗滌并吸干孔中的內容物。

9. 將100 μL的TMB底物溶液移液至每個孔中。

10. 在暗處室溫下精確孵育十分鐘（10）。

11. 十分鐘后，向每個孔中添加100 μL的終止溶液。

12. 在30分鐘內測定每個孔中內容物的吸光度（450 nm）。根據制造商的規格校準板式讀取器。