BioXCell ReadyTag抗GFP：提升GFP標記蛋白研究的精確度與效率

F56-6A1.2.3單克隆抗體與增強型綠色熒光蛋白（GFP）反應。GFP是一種27kDa的蛋白質，當暴露在藍色至紫外線范圍內的光下時，會發出亮綠色熒光。在細胞和分子生物學中，GFP已成為一種寶貴的工具。GFP通常用于可視化特定的細胞群，并作為基因表達和定位的報告者。YFP與GFP的不同之處在于T203Y處的突變；針對全長GFP產生的抗體也應檢測YFP和其他變體。

作為BioXCell在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦BioXCell熱銷產品ReadyTag抗GFP。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

ReadyTag抗GFP：

同型 小鼠IgG2b

推薦稀釋液 使用InVivoPure pH 7.0稀釋液

偶聯 本產品未進行偶聯?？赏ㄟ^我們的抗體偶聯服務進行偶聯。

免疫原 全長增強型綠色熒光蛋白（enhanced GFP）

報告應用 西方印跡法

免疫熒光

配方 磷酸鹽緩沖液，pH 7.0

不含穩定劑或防腐劑

內毒素 <2EU/mg（<0.002EU/μg）

通過LAL凝膠凝集試驗測定

純度 >95%

通過SDS-PAGE測定

無菌性 0.2微米過濾

生產 在無動物設施中從細胞培養上清液中純化

純化 使用蛋白G

RRID AB_2687789

分子量 150千道爾頓

儲存 抗體溶液應以原始濃度在4°C下儲存。請勿冷凍。

文獻參考：

Immunofluorescence

Earley, L. F., et al. (2015). "Identification and characterization of nuclear and nucleolar localization signals in the adeno-associated virus serotype 2 assembly-activating protein" J Virol 89(6): 3038-3048.

腺相關病毒血清型2（AAV2）的組裝激活蛋白（AAP）是一種核仁定位蛋白，在將病毒衣殼VP3蛋白運輸到核仁進行組裝中起著關鍵作用。在這里，我們鑒定和表征了AAP2羧基末端區域（氨基酸位置144至184）附近的AAV2-AAP（AAP2）核（NLS）和核仁（NoLS）定位信號（AAP2（144-184））。該區域從氨基末端到羧基末端包含五個富含基本氨基酸（BR）的簇，KSKRSRR（AAP2BR1）、RRR（AAP2B R2）、RFR（AAP2 BR3）、RSTSSR（AAP2B R4）和RRIK（AAP2B R5）。我們分別通過精氨酸/賴氨酸到丙氨酸的突變或刪除AAP2BR和8個和1個綠色熒光蛋白（GFP）-AAP2BR和β-半乳糖苷酶-APA2BR融合蛋白創建了30個AAP2BR突變體，并通過免疫熒光顯微鏡分析了它們在HeLa細胞中的細胞內定位。結果表明，AAP2（144-184）具有冗余的多部分NLS，4個AAP2BR的任何組合，但不是3個或更少，都可以構成功能性的NLS-NoLS；AAP2BR1和AAP2BR2在核定位中起著最有影響力的作用，但如果所有4個其他AAP2BR都存在，則這兩個AAP2BR中的任何一個都是不必要的，從而產生3個不同的重疊NLS基序；并且NoLS以依賴于上下文的方式在五個AAP2BR和功能之間冗余地共享。AAP2BR突變不僅導致細胞內定位異常，還不同程度地減弱了AAP2蛋白的表達，這兩種異常都對衣殼的產生產生了顯著的負面影響。因此，本研究揭示了AAP2中混合NLS和NoLS的組織，并深入了解了它們在衣殼組裝中的功能作用。重要：腺相關病毒（AAV）已成為體內基因治療的流行和成功的載體；然而，它的生物學尚未被完全理解。在這方面，最近發現的組裝激活蛋白（AAP）是一種非結構、核仁定位的AAV蛋白，對病毒衣殼組裝至關重要，這為我們更好地了解病毒顆粒形成所需的基本過程提供了新的機會。在這里，我們鑒定了來自AAV血清型2（AAV2）的AAP羧基末端的堿性氨基酸簇，它們充當核和核仁定位信號。我們還證明了它們在維持AAP表達水平和有效生產病毒衣殼方面的重要性。深入了解AAP的功能可以闡明AAV衣殼組裝的要求和過程，這可能會改善用于基因治療的載體生產。這項研究也為越來越多的核和核仁定位信號研究做出了貢獻。

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