SIN載體，抗CD 19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z）方案

發布者：艾美捷科技發布時間：2024-08-06

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抗CD19 CAR慢病毒是復制能力不強、基于HIV的VSV-G假型慢病毒顆粒，已準備好轉導大多數哺乳動物細胞，包括原代細胞和非分裂細胞。這些病毒轉導與第二代CAR（嵌合抗原受體）連接的抗CD19（克隆FMC63）的ScFv部分，該部分含有CD8鉸鏈和跨膜結構域、4-1BB和CD3ζ信號結構域。該構建體還包括抗CD19 CAR盒下游的IRES增強型綠色熒光蛋白（eGFP）序列，以促進轉導細胞的分析和分選（圖1）。

抗CD19 CAR慢病毒

圖1。（A）用于產生抗CD19 CAR慢病毒的慢病毒載體示意圖。該向量是SIN向量，它包含eGFP。（B）構建顯示抗CD19 CAR成分的圖。

注：該產品轉導的抗CD19 CAR構建體（CD19 ScFv-CD8-4-1BB-CD3ζ）與其他可用的抗CD19CAR慢病毒（BPS Bioscience#78600、78601和78602）相同，但在關鍵方面有所不同。該產品含有eGFP報告/選擇標記，因此可以根據eGFP表達對轉導的細胞進行分類。請參閱表1。

艾美捷抗CD19 CAR慢病毒（CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z，eGFP）（#BPS-78775）：

提供形式：50微升的抗CD19 CAR，滴度≥3×10^8 TU/ml。每批的滴度可能會有所不同；確切的數值會隨每次發貨提供。

配方：這些慢病毒是從HEK293T細胞生產的，經過濃縮并重新懸浮在DMEM中。

儲存/穩定性：慢病毒隨干冰發貨。長期儲存建議在-80°C下保存慢病毒，自收到之日起可保存長達12個月。避免重復凍融。每次凍融都可能導致滴度顯著下降。

培養基：

T細胞培養基：TCellM?（BPS Bioscience #78753）補充了10 ng/ml的白介素-2（BPS Bioscience #90184）。

實驗所需的培養基：

解凍培養基3（BPS Bioscience #60186）：F-12K培養基（Kaighn對Ham's F-12培養基的改良）補充了10% FBS，1%青霉素/鏈霉素。

應用：作為T細胞中抗CD19 CAR評估的陽性對照。

轉導優化實驗。

生成抗CD19 CAR-T細胞（僅限研究使用，不用于治療目的）。

運輸溫度：-80°C。