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抗CD 19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體)應用介紹

發布者:艾美捷科技    發布時間:2024-08-05     
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CD19(也稱為分化簇19、B淋巴細胞表面抗原B4或CVID3)是在B細胞成熟的大多數階段在B淋巴細胞表面表達的糖蛋白。它是B細胞終末分化的嚴格要求。CD19基因的突變會導致與受影響的抗體產生相關的嚴重免疫缺陷綜合征,如CVID3(常見變量免疫缺陷3)。大多數B細胞惡性腫瘤表達正常至高水平的CD19,使其幾乎成為癌癥免疫療法的理想靶點。Blinatumomab是一種CD19/CD3雙特異性T細胞接合劑(BiTE),已被批準用于復發/難治性B前體ALL(急性淋巴細胞白血?。?,CD19是首個獲批的CAR-T細胞療法的靶點。CD19功能和表達譜的研究將繼續擴大我們的知識,并支持在癌癥治療中更廣泛的應用。

 

抗CD19 CAR慢病毒是復制能力不強的、基于HIV的VSV-G假型慢病毒顆粒,可以轉導大多數哺乳動物細胞,包括原代細胞和非分裂細胞。這些病毒轉導與第二代CAR(嵌合抗原受體)連接的抗CD19(克隆FMC63)的ScFv部分,含有CD8鉸鏈、4-1BB和CD3ζ信號結構域(圖1)。

抗CD 19 CAR慢病毒

圖1. (A) 用于產生抗CD19 CAR慢病毒的慢病毒載體示意圖。這個載體是一個自我滅活(SIN)載體。沒有包含任何哺乳動物選擇標記。 (B) 構建圖示顯示了抗CD19 CAR的組成部分。注意:該產品轉導了與其他可獲得的抗CD19 CAR慢病毒(BPS Bioscience # 78600, 78602 和 78775)相同的抗CD19 CAR構建(CD19 ScFv-CD8-4-1BB-CD3ζ),但在關鍵方面有所不同。請見圖2。

 

艾美捷抗CD 19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體)(#BPS-78601)應用:

作為T細胞中抗CD19 CAR評估的陽性對照。

轉導優化實驗。

產生抗CD19 CAR-T細胞(僅限研究使用,不得用于治療目的)。

配方:

慢病毒顆粒由HEK293T細胞生產、濃縮,并在DMEM中重新懸浮。根據特殊請求,可以按定制配方包裝病毒顆粒,需額外收費。

尺寸和滴度:

每瓶(50 ?l)抗CD19 CAR的滴度≥ 3 x 10^8 轉導單位(TU)/ml。每批的滴度會有所不同;確切的數值隨每次發貨提供。

存儲:

慢病毒通過干冰運輸。長期存儲建議將病毒存放在-80°C。避免反復凍融循環。每次凍融循環都可能導致滴度顯著下降。

生物安全:

慢病毒是使用第三代自我滅活(SIN)慢病毒載體生產的,確保慢病毒載體在轉導和整合到目標細胞的基因組DNA后自我滅活。由于它們來自缺乏包裝信號的包裝質粒,因此轉導細胞中不會表達任何HIV基因(gag、pol、rev)。盡管假型慢病毒是復制能力不足的,但它們需要在生物安全等級2的設施中使用。BPS建議遵循所有地方聯邦、州和機構的規定,并采取所有適當的安全預防措施。

未提供的必需材料:

這些材料不隨慢病毒提供,但必須按照設計協議使用。BPS Bioscience培養基、試劑和熒光素酶檢測系統都經過驗證和優化,建議使用這些材料以獲得z佳結果。

 

抗CD 19 CAR慢病毒(CD 19 ScFv-CD 8 -4- 1BB-CD 3 z; SIN載體)相關產品:

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