BPS Bioscience CD40 - HEK293 細胞系：TNF受體家族成員功能探究

CD40，作為腫瘤壞死因子受體超家族的成員，最初是在B淋巴細胞上被發現的。然而，其他細胞類型，如單核細胞、嗜堿細胞、樹突狀細胞、內皮細胞和上皮細胞，也被發現表達CD40。在許多人類癌癥中，包括HCT116（一種結腸癌細胞系），也檢測到高水平的CD40。與CD4+ T輔助淋巴細胞上的CD40配體（CD40L，CD154）相互作用，會觸發細胞間粘附分子（ICAM）和其他促炎細胞因子的表達。CD40：CD40L信號同時增加了抗原特異性T細胞的激活。CD40還能激活依賴NF-κB的信號，以響應革蘭陰性細菌病原體上的脂多糖（LPS）。激動型CD40單克隆抗體已被證明能激活抗原呈遞細胞（APC），促進抗腫瘤T細胞反應，并培養細胞毒性髓樣細胞，這表明在缺乏T細胞免疫的情況下控制癌癥的潛在機制。

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描述

重組HEK293細胞系表達全長人類CD40（腫瘤壞死因子受體超家族成員5；TNFRSF5），Genbank登錄號NP_001241.1。通過實時定量PCR和西方印跡確認表達。

應用

由于HEK293細胞系不表達內源性CD40，CD40 HEK293細胞系是監測CD40特異性信號響應，如潛在CD40激動型單克隆抗體引起的NF-κB激活的理想選擇。

宿主細胞

人類胚胎腎細胞系（HEK293）。貼壁上皮細胞。

格式

每瓶含有約2 x 10^6個細胞，懸浮于1毫升含10% DMSO的FBS中。

儲存

收到后立即在液氮中保存。

培養基

解凍培養基1（BPS Bioscience #60187）：MEM培養基（Hyclone #SH30024.01）補充10% FBS（Thermo Fisher, Cat. #26140079）、1%非必需氨基酸（Hyclone #SH30238.01）、1 mM Na焦磷酸鹽（Hyclone #SH30239.01）、1%青霉素/鏈霉素（Hyclone SV30010.01）。

生長培養基1F（BPS Bioscience #79540）：解凍培養基1，外加100 ?g/ml潮霉素B（Thermo Fisher, Cat. #10687010）。

圖1. CD40/HEK293穩定細胞表面CD40表達。流式細胞儀顯示APC偶聯的抗人CD40抗體，克隆HB14（Biolegend, Cat #313008）檢測CD40陽性細胞（綠色），以未修飾的HEK293細胞（藍色）作為陰性對照。

文獻參考：

1. Diaconu I. et.al. (2012) Immune Response is an Important Aspect of the Anti-tumor Effect Produced by a CD40L-Encoding Oncolytic Adenovirus. Cancer Res. 72: 2327.

2. Yacoub D et.al. (2013) CD154 is Released from T-cells by a Disintegrin and Metalloproteinase Domain-containing Protein 10 (ADAM10) and ADAM17 in a CD40 Protein-dependent Manner. J. Biol. Chem. 288: 36083.

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