Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA試劑盒，體外定量測定

Asprosin 是哺乳動物在其脂肪（白色脂肪）組織中產生的一種蛋白質激素，可刺激肝臟 將葡萄糖釋放到血液中。在這些組織中，asprosin 由基因 FBN1 編碼，該基因也編碼蛋白質 原纖維蛋白。在肝臟中，asprosin 通過環磷酸腺苷 （cAMP） 依賴性途徑激活快速葡萄糖釋放。 Asprosin 最初由 Batul Chopra 博士和貝勒醫學院的同事鑒定為 C 端切割產物 FBN1基因產物profibrillin。他們在兩名先天性部分脂肪營養不良患者中發現了FBN1基因突變，并且 早衰樣外觀。這兩名患者是Lizzie Velasquez和Abby Solomon。這些患者中 FBN1 蛋白的截斷 被認為對蛋白質產生有兩個后果：突變/截短的原纖維蛋白和非常低的血漿 asprosin 水平 （來自假設的顯性負面影響）。此后，這種情況被命名為馬方樣-早衰-脂肪營養不良綜合征。

Abbexa/艾美捷人Asprosin ELISA Kit是一種ELISA試劑盒，用于體外定量測定血清、血漿、細胞培養上清液、組織勻漿、細胞裂解物和其他生物體液中人Asprosin的濃度。低水平的阿斯普羅辛可用于指示馬凡脂肪營養不良綜合征，高水平的阿斯普羅辛可以在肥胖患者中發現。

Abbexa人Asprosin ELISA試劑盒檢測原理：

該試劑盒基于夾心酶聯免疫吸附測定技術。將抗體預包被到 96 孔板上。將標準品、測試樣品和生物素偶聯試劑加入孔中并孵育。然后加入HRP偶聯試劑，孵育整個板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的偶聯物。TMB 底物用于定量 HRP 酶促反應。加入TMB底物后，只有含有足夠FBN1的孔才會產生藍色產物，然后在加入酸性終止溶液后變為黃色。黃色的強度與板上結合的 FBN1 量成正比。在酶標儀中以450nm處的分光光度法測量光密度（OD），從中可以計算FBN1的濃度。

試劑制備：

此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊上的規定使用，并與產品一起交付。

1）標準品：用推薦體積的標準稀釋緩沖液配制標準品，制成標準溶液。然后按照實驗方案中的說明，使用標準稀釋劑緩沖液對標準溶液進行連續稀釋。

2） 洗滌緩沖液：按照實驗方案中的說明，用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。

3）檢測試劑制備：計算所需工作液的總體積。稀釋檢測試劑 A 和檢測試劑 B 分別用稀釋劑 A 和稀釋劑 B 以 1：100 的比例稀釋。

檢測程序：

此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊上的規定使用，并與產品一起交付。

1）制定標準，測試樣品和控制井。

2） 將 100 μl 稀釋的標準品分裝到標準孔中。

3） 將 100 μl 標準稀釋緩沖液分裝到對照（零）孔中。

4） 將 100 μl 稀釋的樣品分裝到樣品孔中。在37°C孵育1小時。

5） 將 100 μl 檢測試劑 A 分裝到每個孔中。在37°C孵育1小時。

6）洗滌3次。

7） 將 100 μl 檢測試劑 B 分裝到每個孔中。在37°C孵育30分鐘。

8）洗滌5次。

9） 將 90 μl TMB 底物分裝到每個孔中。在37°C孵育10-20分鐘。

10） 分裝 50 μl 終止液。

11） 在 450 nm 處測量外徑。

協議：

此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊上的規定使用，并與產品一起交付。

使用前將試劑盒組分和樣品平衡至室溫（18 - 25°C）。建議為每個測試繪制一條標準曲線。

1.在預涂板上分別設置標準、測試樣品和對照（零）孔，然后記錄它們的位置。建議至少測量每個標準品和樣品一式兩份。

2. 將 100 μL 每種標準品、對照品和樣品加入適當的孔中。用蓋子密封板，在 37°C 下孵育 1 小時。

3. 取下蓋子，丟棄液體。

4. 向每個孔中加入 100 μl 檢測試劑 A 工作溶液。用蓋子密封板，在 37°C 下孵育 1 小時。

5. 取下蓋子并丟棄溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌板 3 次。

6. 向每個孔中加入 100 μL 檢測試劑 B 工作液，密封并在 37°C 下孵育 30 分鐘。

7. 棄去溶液，按照上一步所述用洗滌緩沖液洗滌板 5 次。

8. 將 90 μl TMB 底物分裝到每個孔中。用蓋子密封板，在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。避免暴露在光線下。孵育時間僅供參考，最佳時間應由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘。

9. 向每個孔中加入 50 μL 終止液。立即以 450 nm 讀取。

結果計算：

計算時，對每個參考標準和每個樣品的 O.D.450 重復讀數求平均值，然后減去平均對照（零）O.D.450 讀數。標準曲線可以繪制為每種參比標準溶液[Y]的相對外徑450與每種標準溶液（X）的相應濃度的關系。樣品的Asprosin濃度可以從標準曲線中插值。

檢測精密度：

測定內精密度（測定內精密度）：在一個平板上分別測試3個低、中、高水平Asprosin樣品20次。

批間精密度（測定間精密度）：在 3 個不同的平板上測試 3 個含有低、中、高水平 Asprosin 的樣品，每個平板重復 8 次。

CV （%） =（標準偏差/平均值） × 100 批內：CV<10%批間：CV<12%

僅供研究使用。 范圍和靈敏度可能會發生變化。

作為在中國的區域Abbexa代理，艾美捷將為中國客戶提供全面的Abbexa產品以及客戶訂制化服務。