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抗羊駝二抗--精準檢測 “密鑰” ,革新免疫實驗的關鍵角色

發布者:艾美捷科技    發布時間:2025-02-28     
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VHH 抗體:生物醫藥領域的新興力量

在生物醫學研究的廣闊領域中,VHH 抗體正逐漸嶄露頭角,成為備受矚目的研究對象。作為一種獨特的抗體類型,VHH 抗體以其諸多優異特性,為生物醫藥領域帶來了新的希望和突破。

 

VHH 抗體,全稱為 Variable domain of heavy chain of HCAb,又被稱為單域抗體或納米抗體 。它源自駱駝科動物(如駱駝、羊駝等)的重鏈抗體,是重鏈抗體的可變區片段。與傳統抗體不同,VHH 抗體僅由一個重鏈可變區組成,沒有輕鏈,這使得其結構相對簡單,分子尺寸也遠小于傳統抗體,通常只有約 15 kDa ,大約是傳統 IgG 抗體的 1/10。

 

這種獨特的結構賦予了 VHH 抗體許多傳統抗體所不具備的優勢。小尺寸使 VHH 抗體具有良好的組織滲透性,能夠更容易地穿透組織和細胞,到達一些傳統抗體難以觸及的部位,這在疾病診斷和治療中具有重要意義。例如,在腫瘤治療中,VHH 抗體可以更有效地滲透到腫瘤組織內部,實現對腫瘤細胞的精準靶向。


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駱駝科動物(如駱駝、羊駝、美洲駝)的免疫系統具有獨特的雙抗體類型:常規的四鏈免疫球蛋白(IgG1)和僅由重鏈組成的抗體(HcAbs,即IgG2和IgG3亞類)。常規IgG由兩條重鏈(H鏈)和兩條輕鏈(L鏈)組成,而HcAbs完全缺乏輕鏈,且重鏈缺失CH1結構域,僅通過可變重鏈結構域(VHH)進行抗原結合。VHH的分子量約為12-15 kDa,僅為常規IgG(約150 kDa)的十分之一,因此被稱為“納米抗體”。

 

VHH的結構與功能優勢

1. **小尺寸與組織穿透性**  

VHH的微小體積使其能夠穿透細胞膜或致密組織,適用于細胞內流式細胞術、免疫組化(IHC)及腫瘤微環境靶向等場景。例如,在癌癥成像中,VHH可高效定位傳統抗體難以到達的抗原表位。

2. **高穩定性與可溶性**  

VHH表面親水性氨基酸的替換增強了其溶解性,避免了傳統單鏈抗體(scFv)的聚集問題。其熱穩定性也優于常規抗體,可在高溫或極端pH條件下保持活性,適合工業化生產。

3. **抗原結合特性**  

VHH通過三個互補決定區(CDRs)識別抗原,其中CDR3在結合中起關鍵作用。盡管缺乏輕鏈,VHH的親和力與常規抗體相當,甚至在某些情況下表現出更強的特異性。

4. **工程化潛力**  

VHH的cDNA易于克隆和改造,可靈活連接熒光標記、毒素或放射性同位素,用于多功能診斷或治療工具開發。例如,其單域結構允許細菌或酵母表達系統高效生產,成本低于哺乳動物細胞培養。

 

科研與醫學應用

**診斷工具開發**  

SouthernBiotech公司提供針對駱駝科IgG亞類(如IgG2/3)及VHH的二抗,包括單克隆和多克隆試劑,支持流式細胞術、ELISA和免疫印跡等檢測。

https://www.southernbiotech.com/wp/wp-content/uploads/2022/10/Anti-Llama-Secondary-Antibodies-Brochure-00.pdf

HcAb占駱駝血清IgG的50%-75%,表明其在天然免疫中具有重要功能。例如,駱駝免疫白喉類毒素后產生的HcAb能高效中和毒素,提示其作為天然抗感染工具的潛力。不同證據對HcAb的分子量(100 kDa或90 kDa)及血清占比(駱駝75% vs. 美洲駝50%)存在細微差異,可能源于物種或檢測方法差異。此外,VHH的CDR3長度和結構多樣性可能影響其應用范圍,需通過噬菌體展示庫篩選優化。

 

綜上,駱駝科VHH憑借其獨特的結構和功能優勢,正在推動抗體工程、精準醫療和診斷技術的革新,同時為理解免疫系統進化提供了獨特視角。


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SouthernBiotech產品舉例】

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將純化的羊駝 IgG1、IgG2/IgG3、IgM 以及一種 VHH 抗體包被在酶聯免疫吸附測定(ELISA)板上。使用小鼠抗羊駝 IgG2/IgG3 非標記抗體(5880-01L)檢測免疫球蛋白,隨后使用經人源吸附的山羊抗小鼠 IgG2b - 辣根過氧化物酶(HRP)標記抗體(1090-05)進行檢測。


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將羊駝免疫球蛋白G(IgG)和羊駝血清進行電泳分離,轉移至聚偏二氟乙烯(PVDF)膜上,然后用小鼠抗羊駝免疫球蛋白M-未標記抗體(Mouse Anti-Llama IgM-UNLB,5820-01L)進行孵育檢測,接著使用經人源吸附的山羊抗小鼠IgG2b-辣根過氧化物酶標記抗體(Goat Anti-Mouse IgG2b, Human ads-HRP,1090-05)處理,并通過化學發光法進行檢測。

 

SouthernBiotech提供了一種全面的選擇,包括針對Ig重鏈類別的抗羊駝第二抗體以及IgG(H+L)和VHH的單克隆和多克隆第二抗體。VHH抗體因其高特異性、親和力以及在缺乏輕鏈的情況下仍能有效結合抗原的能力,在癌癥診斷和治療等醫學應用中顯示出重大潛力。


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