AAT Bioquest細胞死亡與細胞周期檢測工具

一．凋亡與壞死檢測

在生命科學的浩瀚海洋中，細胞凋亡與壞死的研究猶如一顆璀璨的明珠，吸引著無數科研工作者的目光。AAT Bioquest 作為一家專業的生物試劑供應商，憑借其卓越的產品和服務，成為了這一領域不可或缺的重要伙伴。

細胞凋亡，也稱為程序性細胞死亡，是多細胞生物胚胎發育和組織穩態維持的關鍵環節。處于凋亡過程中的細胞具有一系列獨特的形態學變化和依賴能量的生化機制特征，如細胞膜起泡、細胞收縮、半胱天冬酶級聯反應激活、染色質凝聚以及 DNA 片段化，還會產生膜包裹的凋亡小體。由于沒有任何單一參數能夠完全定義凋亡，因此在細胞死亡的研究中，我們經常采用了多種不同的方法。

AAT Bioquest 擁有豐富多樣的凋亡試劑和檢測方法，能夠測量多種凋亡標志物，包括：

※Annexin V 檢測試劑盒

※半胱天冬酶活性檢測試劑盒

※TUNEL 檢測試劑盒

※線粒體膜電位（ΔΨm）指示劑

※谷胱甘肽監測試劑盒

表 1：用于檢測凋亡和壞死的產品

二．細胞周期檢測

細胞周期是細胞生命活動的核心過程之一，其調控機制的研究對于理解細胞生長、分化、衰老以及疾病發生發展具有重要意義。AAT Bioquest 作為全球領先的生物試劑供應商，憑借其卓越的產品和技術，為細胞周期檢測提供了全面而高效的解決方案。

流式細胞術檢測細胞周期：精準洞察細胞生命進程

流式細胞術通過測量細胞內DNA含量來評估DNA倍體水平，并確定細胞群體處于細胞周期不同階段的百分比。在細胞群體中，細胞在細胞周期的主要階段（G0/G1、S 和 G2/M）的分布是基于它們的DNA含量差異。通過使用與DNA結合的熒光染料，這些染料的發射信號與每個細胞中的DNA含量成正比，流式細胞術分析可以生成頻率直方圖，從而估算每個細胞周期階段的細胞百分比。細胞周期分析可用于研究腫瘤行為，檢測生長模式的變化，監測凋亡，并評估各種藥物對細胞周期進程的影響。

活細胞周期檢測：實時追蹤細胞動態

AAT Bioquest 的 Cell Meter 熒光活細胞周期檢測試劑盒為監測活細胞、透化細胞和固定細胞的細胞周期進程提供了一種簡單而靈敏的方法。每種試劑盒均含有專利的膜滲透性、非熒光、DNA 選擇性染料。這些染料與 DNA 結合后，會發出與每個細胞中 DNA 含量成正比的熒光信號。通過流式細胞術分析染色細胞群體，可以生成頻率直方圖，提供有關細胞周期主要階段相對百分比的信息。

Cell Meter 熒光法活細胞周期檢測試劑盒選擇指南：

這些試劑盒中的 DNA 染料設計用于匹配標準激光線的主要波長。Nuclear Violet（試劑盒 22845 的 DNA 染料成分）非常適合 405 nm（紫色）激光線，但也可以被 355 nm（紫外）激光激發。Nuclear Green LCS1（試劑盒 22841 的 DNA 染料成分）和 Nuclear Red CCS2（試劑盒 22860 的 DNA 染料成分）非常適合 488 nm（藍色）激光線。Nuclear Red CCS2 還可以使用 532 nm（綠色）激光線激發。除了方便使用外，這些非細胞毒性的核 DNA 染料還可以與額外的活細胞應用進行多重檢測，包括免疫表型分析、GFP 細胞分析、流式細胞術分選、CFSE 細胞追蹤和凋亡亞 G1 期群體分析。這些核 DNA 染料還以 0.5 mL 單獨試劑的形式提供，并有多種其他熒光發射形式，包括 Nuclear Yellow（Ex/Em = 368/501 nm，17539）、Nuclear Orange LCS1（Ex/Em = 512/554 nm，17541）、Nuclear Red LCS1（Ex/Em = 622/645 nm，17542）和 Nuclear Red LCS2（Ex/Em = 651/681 nm，17545）。

固定細胞周期檢測：經典方法與創新結合

對于固定細胞周期分析，AAT Bioquest 提供了適用于流式細胞術的 Cell Meter 熒光固定細胞周期檢測試劑盒（22842），以及經典的細胞周期染料，如 DAPI（17511）、碘化丙啶（17515）和 7-AAD（17501）。試劑盒 22842 中的染料成分 Nuclear Red CCS1 是一種膜不滲透性、藍色激光激發的 DNA 染料。在固定細胞中與 DNA 結合時，Nuclear Red CCS1 會顯著增強熒光，其信號強度與每個細胞中的 DNA 含量成正比。由于 Nuclear Red CCS1 還會與 RNA 結合，因此需要使用 RNase A 處理（試劑盒成分 B）進行 DNA 含量分析。Nuclear Red CCS1 的峰值發射約為 618 nm，可以使用 PE-Texas Red 的相同濾光片進行檢測，例如 610/20 帶通濾光片。

Cell Meter 熒光法固定細胞周期檢測試劑盒：

經典細胞周期染料：可靠的選擇 

用于細胞周期分析的常見核酸染料包括 Hoechst 33258（17520、17523、17525）、Hoechst 33342（17530、17533、17535）、DAPI（17507、17510、17511、17513）、PI（17515、17516、17517）和 7-AAD（17501）。Hoechst 染料和 DAPI 是 UV 激光激發染料，發射波長約為 460 nm，而 PI 和 7-AAD 則利用常見的 488 nm 激發源，發射波長分別為 618 nm 和 648 nm。在這些經典染料中，Hoechst 33342 和 Hoechst 33258 適用于活細胞周期分析，盡管據報道 Hoechst 33258 的細胞滲透性較低。然而，使用 DAPI、PI 或 7-AAD 進行細胞周期分析時，需要對細胞進行固定和透化處理。對于像 PI 這樣非 DNA 特異性的染料，它還會染色其他雙鏈核酸，如 RNA，因此在進行 DNA 含量分析時需要使用 RNase A 處理。

經典的細胞周期染料選擇指南：