Biosensis示蹤試劑--可視化神經退行性疾病的發展路徑！

Biosensis提供多種已建立且經過良好特性化的追蹤試劑，用于檢測退化的神經元（Fluoro-Jade B和C）、淀粉樣斑塊（Amylo-Glo和HQ-O）以及正常和病理性髓鞘（Black Gold II）。這些染色試劑是卓越的研究工具，提供了最大的靈活性，以研究神經退行性疾病的途徑和疾病修飾藥物。

Biosensis追蹤試劑展示出幾個關鍵優勢：

△在高影響力期刊上發表豐富——質量由您的同行驗證

△詳細的協議——保證易于使用的試劑有效

△卓越的技術支持——確保您的實驗成功

△靈活性——與各種組織類型、染色技術和現有的抗體免疫染色協議兼容

用熒光玉B和C識別退化神經元

神經元退化的原因和影響引起了眾多神經科學家的極大興趣。與這種興趣并行的是越來越多的適用于檢測神經元退化的方法。熒光玉B（FJB）和C（FJC）示蹤試劑對所有退化的神經元進行染色，無論其受到何種損傷或細胞死亡機制。

左圖：老年糖尿病大鼠海馬CA3區退化神經元的Fluoro-Jade C（FJC）染色（綠色）。藍色：DAPI核染色。圖片由王博士及其同事提供（Wang S. et al. (2020)）。

右圖：使用結合藍色和紫外線上熒光照明的雙重曝光，展示了暴露于卡因酸的大鼠扣帶回皮層表層。第一層含有明顯的Fluoro-Jade C陽性退化軸突末梢。第二層含有密集的DAPI陽性存活顆粒細胞。第三層含有FJC陽性退化錐體細胞和DAPI陽性存活錐體細胞的混合。照片由Larry Schmued博士提供。

FJC展現出最高的信噪比和最高的分辨率。這意味著它對退化神經元的染色具有最大的對比度和親和力，使其成為定位不僅退化的神經細胞體，還有遠端樹突、軸突和末梢的理想選擇。該染料對褪色高度抵抗，并且與幾乎所有的組織學處理和染色協議兼容。

熒光染料Fluoro-Jade B（FJB），與其更純凈的兄弟FJC一樣，是一種陰離子熒光素衍生物，適用于正在退化的神經元的組織學染色。FJB與FJC的不同之處在于，它是一種稍欠精煉的化學配方，因此它不提供與FJC相同的信噪比或高分辨率。盡管如此，FJB仍然被廣泛使用，并且作為退化神經元甚至膠質細胞的標記物效果非常好（見Damjanac M et al., 2007）。FJB的操作協議與FJC幾乎相同，并且FJB與包括免疫熒光和熒光尼氏技術在內的幾種其他標記程序兼容。

Biosensis Fluoro-Jade B和C追蹤試劑提供以下規格：

注意：TR-150-FJ 相當于 Merck-Millipore 的停產產品 AG310，R-160-FJ相當于 Merck-Millipore 的停產產品 AG325。

使用Amylo-Glo和HQ-O識別淀粉樣斑塊

Amylo-Glo即用型（RTD）染色試劑（TR-300-AG）旨在對組織切片中的淀粉樣斑塊進行染色。由于其獨特的化學和光譜特性，這種標記物比其它傳統標記物如Thioflavin S和Congo Red具有多個優勢（Schmued L et al., 2012）。使用Amylo-Glo在生理條件下會產生非常明亮的藍色紫外線激發染色，在使用其他濾光片照明時不會發生滲色。其亮度使其非常適合低放大倍數的定量研究，而其獨特的激發/發射特性和溫和的染色條件使其非常適合用于多重免疫熒光標記研究。Amylo-Glo RTD與新鮮、冷凍和福爾馬林固定的免疫組化或免疫細胞化學兼容，并且由于其高熒光強度、高抗光漂白性和紫外線通道熒光的獨特特性，特別適合共聚焦和多重標記。

左圖：三重曝光允許在AD/Tg小鼠海馬中同時定位Amylo-Glo陽性淀粉樣斑塊（藍色）、GFAP陽性肥大的星形膠質細胞（綠色）和活化的小膠質細胞（紅色）。結合紫外線、藍光和綠光照明。

右圖：在AD/Tg小鼠海馬的齒狀回區域，Amylo-Glo標記淀粉樣斑塊（藍色）與乙二胺溴化物尼氏（細胞體）對比染色（紅色）。

Biosensis Amylo-Glo RTD淀粉樣斑塊染色試劑與EtBr對比染色（TR-400-AG）試劑盒利用乙二胺溴化物對比染色，快速有效地可視化細胞核和細胞體，同時在紫外線照明下允許一步評估淀粉樣斑塊和細胞/組織定位。

HQ-O即用型（RTD）追蹤試劑旨在標記石蠟包埋或新鮮切割的冷凍組織切片中的淀粉樣斑塊。作為一種熒光鋅螯合劑，HQ-O是獨特的，因為它利用了已知的淀粉樣斑塊中濃縮鋅的存在。HQ-O的研究表明，只有在鋅的存在下合成的Aβx-42聚集時才會看到類似斑塊的熒光結構。在藍光激發下，腦實質中的斑塊結構呈現出鮮綠色熒光，與Aβ抗體染色后觀察到的斑塊結構密切相關。HQ-O RTD染色試劑與其它熒光團兼容，如DAPI、Hoechst和乙二胺溴化物，以及在熒光顯微鏡的藍色和/或紅色發射范圍內具有發射光譜的熒光標記抗體。由于其鋅螯合特性，HQ-O RTD染色試劑可能會可視化血管內的小球狀結構和血管內白細胞。

 D：在海馬CA4區域，使用GFAP抗體共標記展示了肥大的星形膠質細胞（橙色）與它們通常包圍的淀粉樣斑塊（綠色）之間的關系。GFAP免疫反應性用TRITC熒光團可視化。E：在患有阿爾茨海默病的人類皮層中可以看到三個淀粉樣斑塊（綠色）。F：人類AD患者的皮層中血管斑塊的一個例子。

HQ-O即用型（RTD）染色試劑相比舊的藍光激發染色劑如Thioflavin S具有多個優勢：

△HQ-O通過其獨特的鋅結合特性，獨立于構象確認地結合到淀粉樣纖維和斑塊上

△與Thioflavin S、Thioflavin T和Congo Red相比，展現出更大的對比度和分辨率

△具有緊密的激發和發射光譜，沒有激發的滲色，容易進行清晰的多重標記研究

△使用常見的藍光（FITC熒光）濾光片（Emax 475 nm）

△與福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）和冷凍組織切片兼容

△比其他任何非紫外線淀粉樣染色劑更容易使用、更清晰、更明亮！

Biosensis 淀粉樣蛋白噬菌斑示蹤試劑有以下規格可供選擇：

識別正常和病理性髓鞘的Black-Gold II

Black-Gold II是一種鹵代磷酸金復合物，它可以在中樞神經系統內定位髓鞘。Black Gold II即用型（RTD）染色試劑盒允許定位髓鞘，包括單個纖維和纖維束，同時可以選擇通過甲苯胺藍對比染色共定位細胞體。在明場照明下，Black Gold II標記的有髓纖維幾乎呈黑色，而甲苯胺藍O標記的細胞尼氏體呈藍色。

Black Gold II能夠展示和表征與多種神經毒素暴露相關的特定髓鞘變化，包括 kainac酸、domoic酸、3-硝基丙酸、Fluoro-Gold和isoniazid。Black Gold II還可以與其他組織化學標記物結合使用，包括尼氏體染色、逆行轉運的熒光示蹤劑和神經元變性的熒光標記物。與Black-Gold II相關的優勢包括高分辨率、高對比度、短暫的組織化學處理時間、多功能性和一致的可重復性。

左圖：8個月大的Ad-Tg小鼠海馬的明場照明（60倍）。可以在淀粉樣斑塊內外觀察到髓鞘病理。相鄰顆粒細胞和多形細胞的細胞體呈藍色，而單個有髓纖維幾乎呈黑色。照片由L. Schmued博士提供。

右圖：人類腦干下丘腦的鈣調蛋白基因相關肽樣免疫反應性（黑色）和髓鞘染色（紅色，Black-Gold II染色試劑盒，Biosensis），顯示了背柱核下丘腦和三叉神經脊狀體的類似的神經化學和結構組織（Del Fiacco M. et al., 2018）。

Biosensis正常和致病性髓鞘示蹤試劑有以下大小可供選擇：