Jackson-Alexa Fluor 555和568免疫熒光實驗方案

Jackson專業從事親和純化的二抗和純化免疫球蛋白，其產品主要銷往到各地的大學科研所和醫院里的動物研究以及生物醫學研究機構的科學家。

目前艾美捷Jackson全新推出Alexa Fluor 555和Alexa Fluor 568偶聯物。

Jackson現提供Alexa Fluor 555和568二抗偶聯物。隨著橙色通道新增的兩個選擇，組合設計變得更加簡便。本文將會用案例展示JIR Alexa Fluor 偶聯物的實用性。

Jackson-Alexa Fluor 555和568應用：

用于檢測馬來酰亞胺功能基團。

Jackson-Alexa Fluor 555和568關鍵特點：

準備和檢測時間少于1小時。快速且易于使用

當開發針對多個靶標的免疫熒光實驗時，一系列光譜上不同的熒光染料和經過交叉吸附處理以減少與其他物種反應的二抗對于每個靶標特異性檢測和明確結果至關重要。

明亮且易于使用的Alexa Fluor 染料偶聯的二抗，現在新增了兩種新的偶聯物：Alexa Fluor  555和568。這兩種新染料補充了我們現有的Alexa Fluor 偶聯二抗系列，為橙色通道提供了兩個新的選擇。

除了全光譜范圍的熒光染料，Jackson免疫研究公司的Alexa Fluor 偶聯二抗還提供廣泛的靶標特異性。它們與驢或山羊宿主二抗偶聯，這些宿主二抗對許多常見物種的交叉反應性最小，以避免多個一抗之間的串擾。

在這里，我們展示了如何將Alexa Fluor  555或568結合到您的四色免疫熒光實驗中。

使用DAPI、Alexa Fluor  488、Alexa Fluor  555、Alexa Fluor  647的四色免疫熒光

這個組合中三種Alexa Fluor 染料的光譜特性（圖1），允許它們與DAPI核染色結合，實現有效的四色免疫熒光。我們通過染色人類上皮細胞（HEp-2細胞）以常見的細胞內蛋白標記物來展示這種熒光團組合。Ki-67蛋白，細胞增殖的標記物（Scholzen和Gerdes., 2000），可以看到呈綠色。細胞骨架結構的方面可以看到呈黃色，通過使用抗α微管蛋白染色微管來可視化。Cis-Golgi基質蛋白，參與高爾基體囊泡的堆疊和維持高爾基體結構（Chang等人，2012），使用抗人GM130/GOLGA2進行可視化，可以在核邊緣看到呈紅色。核被DAPI染色，可以看到呈藍色。（圖2）。

圖1：四色免疫熒光DAPI、Alexa Fluor? 488、Alexa Fluor? 555、Alexa Fluor? 647的光譜及激發和發射細節。

圖2：人類上皮細胞（HEp-2細胞）的間接四色免疫染色。使用兔抗Ki-67抗體后跟Alexa Fluor? 488偶聯的驢抗兔IgG（H+L）（711-545-152），細胞增殖以綠色顯示。使用鼠抗α微管蛋白后跟Alexa Fluor? 555偶聯的驢抗鼠IgG（H+L）（715-565-150），微管以黃色顯示。使用羊抗人GM130/GOLGA2后跟Alexa Fluor? 647偶聯的驢抗羊IgG（H+L）（713-605-147），高爾基結構以紅色顯示。藍色 - DAPI核染色。

Jackson-Alexa Fluor 555和568文獻參考：

Chang, S. H., Hong, S. H., Jiang, H. L., Minai-Tehrani, A., Yu, K. N., Lee, J. H., Kim, J. E., Shin, J. Y., Kang, B., Park, S., Han, K., Chae, C., & Cho, M. H. (2012). GOLGA2/GM130, Cis-Golgi matrix protein, is a novel target of anticancer gene therapy. Molecular therapy : the journal of the American Society of Gene Therapy, 20(11), 2052–2063.

Scholzen, T., & Gerdes, J. (2000). The Ki-67 protein: from the known and the unknown. Journal of cellular physiology, 182(3), 311–322.