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特色產品TIM10(線粒體導入內膜移位酶亞基TIM10)作為膜間伴侶,參與多通道跨膜蛋白導入和插入線粒體內膜。
艾美捷抗TIM 10|線粒體輸入內膜轉位酶亞基TIM 10:
貨號:AS23-4950
免疫原:來自擬南芥(Arabidopsis thaliana)TIM10蛋白序列的KLH偶聯獨特肽。UniProt: Q9ZW33 TAIR: AT2G29530
宿主:兔
克隆性:多克隆
純度:抗原親和純化血清,溶于pH 7.4的PBS中
形式:凍干
數量:50 ug
復溶:復溶時,加入50 ?l無菌或去離子水。
儲存:凍干/復溶后存放于-20°C;復溶后請分裝以避免反復凍融。打開前請簡短離心以避免凍干物粘附于管蓋或管壁導致損失。
測試應用:Western blot (WB)
推薦稀釋度:1: 500 - 1 : 2000 (WB)
預期 | 表觀分子量:9.3 | 11 kDa
確認反應性:擬南芥、豌豆
預測反應性:番木瓜(Carica papaya)、芥菜(Brassica rapa)、鹽芥(Eutrema salsugineum)、玉米(Zea mays)
無反應性:目前尚無已知的與預測反應性不符的例外情況

樣品:
1 - 50 ug擬南芥幼苗分離的線粒體提取物#1
2 - 50 ug擬南芥幼苗分離的線粒體提取物#2
3 - 50 ug擬南芥細胞培養分離的線粒體提取物
4 - 50 ug豌豆幼苗分離的線粒體提取物
5 - 50 ug水稻幼苗分離的線粒體提取物
標記:藍色蛋白標準分子量標記
從擬南芥、豌豆和水稻幼苗中新鮮提取的總蛋白50 ug/孔。線粒體提取方法參照Murcha和Whelan(2015)的線粒體分離協議第1-12頁。樣品在冷條件下在14% SDS-PAGE上分離,并在冷條件下用半干法轉移至硝酸纖維素膜(孔徑0.45 um)1小時。膜用10%脫脂牛奶在4°C下振蕩封閉過夜。然后將膜在1X TBS-Tween中1: 500稀釋的一抗中振蕩過夜/4°C。棄去一抗溶液,膜簡短沖洗兩次,然后在室溫下振蕩用TBS-T洗滌一次15分鐘和三次5分鐘。膜在1X TBS-Tween中1: 10000稀釋的匹配二抗(抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯)中振蕩孵育1小時/室溫。膜按前述方法洗滌,并用化學發光檢測試劑顯影。曝光時間為10分鐘。
線粒體提取方法參照此處描述的方法:MURCHA, M. W. & WHELAN, J. 2015. 從模式植物擬南芥和水稻中分離完整線粒體。見:WHELAN, J. & MURCHA, M. W. (編.) 植物線粒體:方法與協議. 紐約,NY:Springer New York.
感謝澳大利亞西澳大學的Valencia Marisa提供

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