Agrisera 抗NADP-ME|NADP-蘋果酸酶,葉綠體(雙子葉植物/單子葉植物)樣本分析

CALS12/PMR4（胼胝質合酶12）參與孢子體和配子體發育，是正常葉片發育和創傷和病原體攻擊誘導的胼胝質形成所必需的。替代名稱：1,3-β-葡聚糖合酶，蛋白葡聚糖合成酶樣5，蛋白粉MILDEW抗性4。

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抗NADP-ME|NADP-蘋果酸酶,葉綠體(雙子葉植物/單子葉植物)：

免疫原：來自三齒稃草（Flaveria trinervia）NADP-ME的KLH偶聯肽，UniProt: P22178

宿主：兔

克隆性：多克隆

純度：抗原親和純化血清，在PBS pH 7.4中

格式：凍干

數量：50 微克

復溶：復溶時加入50 微升無菌水。

儲存：凍干/復溶后儲存于-20°C；一旦復溶，請分裝以避免反復凍融。請記住，在打開管子前短暫離心以避免由于凍干物質粘附在管蓋或管壁上而造成的任何損失。

測試應用：西方印跡（WB）

推薦稀釋度：1:5000（WB）

預期|表觀分子量：71.5 | 65 kDa（由于N端處理）

確認反應性：三齒稃草，無毛雀麥，穆勒雀麥，水稻，豌豆，玉米

預測反應性：

擬南芥，甜菜，克萊門氏小柑橘，洋薊，卡諾花，赤道椰子，萵苣，三齒稃草，佛羅里達三齒稃草，三齒稃草，三齒稃草，三齒稃草，大豆，野生大豆，向日葵，洋紅木槿，狹葉羽扇豆，馬來西亞香蕉，薏苡，日本鱗毛蕨，芝麻，紅豆，四棱豆，豇豆，豇豆

單子葉植物：大麥，水稻，綠色狗尾草，玉米

樣本：

三齒稃草全葉提取物 - 1

玉米全葉提取物 - 2

穆勒雀麥全葉提取物 - 3

從上述物種的葉片中提取的總蛋白5 微克/孔，在50 mM HEPES, pH 7.1, 1%（w/v）聚乙烯吡咯烷酮，1 mM EDTA, 10 mM DTT, 5 mM MgCl2, 1 mM PMSF中提取，并在90°C下用0.5 M Tris-HCl pH 6.8, 10%（w/v）SDS, 10%（v/v）甘油，0.001%（w/v）溴酚藍變性5分鐘。樣品在10% SDS-PAG上分離，并使用半干轉移法轉移到0.45 微米孔徑的硝酸纖維素上，轉移時間為1小時。用5%（w/v）脫脂奶粉在TBS-T中封閉1小時，室溫下攪拌。用初級抗體（兔抗葉綠體NADP-ME，親和純化血清，AS21 4580 lot 2206）在1:5000稀釋度下在4°C下過夜攪拌。倒掉抗體溶液后，短暫沖洗兩次，然后在室溫下用TBS-T攪拌3次，每次5分鐘。用匹配的二級抗體（抗兔IgG辣根過氧化物酶偶聯）稀釋至1:25000，在室溫下攪拌1小時。如上所述洗滌膜，并用AgriSera AgriseraBright化學發光檢測試劑顯影。曝光時間為30秒或5分鐘。

感謝澳大利亞西澳大學Martha Ludwig教授

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