ALPCO c反應蛋白(貓)ELISA, 96孔試劑準備&文獻參考

CRP檢測試劑盒是一種高靈敏度的雙位點酶聯免疫測定法（ELISA），用于測量貓的CRP生物樣本。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品c反應蛋白(貓)ELISA, 96孔。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

c反應蛋白(貓)ELISA, 96孔檢測原理：

急性期蛋白是血漿蛋白，它們在感染、炎癥或創傷后濃度增加。最早被發現的急性期蛋白是在1930年由Tillet和Frances在貓科動物中發現的。

這種C反應蛋白（CRP）之所以被稱為CRP，是因為它能夠使肺炎鏈球菌的C型多糖體沉淀。CRP是一種α球蛋白，質量在110,000到140,000道爾頓之間，由五個相同的亞基組成，這些亞基以非共價鍵方式組裝成環狀五聚體。它在肝臟中合成，在貓科動物中，通常作為血清的微量成分存在，水平低于0.3 mg/dl。在急性組織損傷后，血清中的含量迅速上升，一旦刺激因素消失，也會非常迅速地下降。已經提出，CRP的功能是幫助補體激活，影響吞噬細胞的功能，并增強細胞介導的細胞毒性。過去幾年的研究表明，在血漿或血清中定量這些蛋白可以為檢測、預后和疾病監測提供有價值的診斷信息，不僅在貓科動物中，在寵物和農場畜群中也是如此。

試劑（足夠進行96次測定的數量）

1. 稀釋液濃縮物（測定緩沖液）

一瓶含有50毫升5倍濃縮稀釋運行緩沖液。

2. 洗滌液濃縮物

一瓶含有50毫升20倍濃縮洗滌液。

3. 酶-抗體結合物100倍

一瓶含有150微升與辣根過氧化物酶結合的親和純化抗貓CRP抗體，在穩定緩沖液中。

4. 顯色基質溶液

一瓶含有12毫升3,3',5,5'-四甲基聯苯胺（TMB）和過氧化氫在檸檬酸緩沖液中，pH值為3.3。

5. 終止液

一瓶含有12毫升0.3 M硫酸。警告：避免與皮膚接觸。

6. 抗貓CRP ELISA微孔板

十二個可移動的八（8）孔微孔板條，在孔座架上。每個孔都涂有親和純化的抗貓CRP。

7. 貓CRP校準物

一瓶含有貓CRP校準物。

試劑準備

1. 稀釋液濃縮物

提供的稀釋液為5倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，4份dH2O）按1:5稀釋。

2. 洗滌液濃縮物

提供的洗滌液為20倍濃縮液，必須用蒸餾水或去離子水（1份緩沖液濃縮物，19份dH2O）按1:20稀釋。濃縮物在低溫儲存時可能會形成晶體。稀釋前將濃縮物加熱至30-35°C可以溶解晶體。

3. 酶-抗體結合物

通過向每個微孔板測試條使用的1X稀釋液中添加10微升酶-抗體結合物和990微升來計算每個微孔板測試條所需的工作結合物溶液量。均勻混合，但要輕柔。避免產生泡沫。

4. 顯色基質溶液

按提供的狀態使用。

5. 終止液

按提供的狀態使用。

6. 抗貓CRP ELISA微孔板

按提供的狀態使用。打開微孔板袋，從袋中取出板。取出在測定中不會使用的所有條和孔，放回袋中并重新密封，同時放回干燥劑。

7. 貓CRP校準物

貓CRP校準物應分裝并冷凍儲存。其濃度為85.07微克/毫升，需要根據下面的圖表在1X稀釋液中進行稀釋以供每次運行使用。貓CRP標準品需要在立即使用前準備（見下面的圖表）。每個步驟之間要充分混合。避免產生泡沫。

文獻參考：

1. Tillett, W.S. and T. Francis. 1930. Serological reactions in pneumonia with non-protein somatic fraction of

pneumococcus. J. Exp Med. 52:561-571.

2. Eckersal, P.D. 2000. Recent advances and future prospects for the use of acute phase proteins and markers of

disease in animals. Revue Med. Vet. 151(7): 577-584

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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