ALPCO 游離睪酮LIA, 96孔，高效診斷工具

用于通過發光免疫法直接定量測定人血清中的游離睪酮。

作為ALPCO在中國的區域總代理，艾美捷科技強烈推薦ALPCO熱銷產品游離睪酮LIA, 96孔。產品僅用于科研，不可用于臨床診斷。

游離睪酮LIA, 96孔試驗原理：

以下化學發光免疫測定的原理遵循典型的競爭性結合場景。未標記的抗原（存在于校準品、對照品和患者樣本中）和酶標記的抗原之間發生競爭，爭奪微孔板上有限數量的抗體結合位點。洗滌和潷析程序可以去除未捆綁的材料。在洗滌步驟之后，加入發光基板。相對發光（RLU）在微量滴定板光度計上測量。RLU值與樣品中游離睪酮的濃度成反比。使用一組校準器繪制標準曲線，從中可以直接讀取患者樣本和對照中游離睪酮的量。該檢測系統中使用的標記睪酮（結合物）對SHBG和人血清白蛋白沒有結合特性。使用低結合能力（Keq x濃度）的高度特異性兔抗睪酮多克隆抗體來最小化睪酮蛋白平衡的干擾。測試系統中的其他組件也經過優化，不會改變原始的游離睪酮濃度。

臨床應用

睪酮是一種C-19類固醇，男性由睪丸和腎上腺皮質分泌，女性則由腎上腺皮質和卵巢分泌。睪酮也可以由外周組織從雄烯二酮轉化而來，這在男性中生理意義不大。然而，在女性中，大約一半的循環睪酮來源于此。睪酮測量主要用于男性性腺功能減退和女性高雄激素狀態的臨床評估。睪酮在血液中與三種蛋白質結合：性激素結合球蛋白（60-80%）、白蛋白和皮質醇結合球蛋白。只有大約1-2%的總循環睪酮保持未結合或游離狀態。盡管仍在研究之中，但大多數研究者接受游離睪酮測定作為生物活性部分的衡量標準。推薦測定游離睪酮以克服運輸蛋白變化對總睪酮濃度的影響。

測定程序

重要提示：

- 使用前所有試劑必須達到室溫。

- 校準品、對照品和樣本應以雙份進行測定。

- 一旦開始程序，所有步驟都應連續完成，不得中斷。

1. 準備游離睪酮-HRP結合物、洗滌緩沖液和LIA底物的1X工作溶液（參見提供的試劑和準備部分）。

2. 取出所需的孔條數量。重新密封袋子，并將任何未使用的孔條放回冷藏。

3. 向相應標記的孔中分別準確移液25 μL的每種校準品、對照品和樣本（建議使用多通道移液管）。

4. 向每個孔中準確移液100 μL的結合物工作溶液。（建議使用多通道移液管）。

5. 覆蓋板子，然后在37°C下孵育板子1小時。

6. 用稀釋后的洗滌緩沖液每個孔300 μL洗滌孔3次，并用吸水紙牢固拍打板子以確保其干燥。（建議使用洗滌器）。

7. 用每個孔300 μL的沖洗液再次洗滌孔3次，并用吸水紙牢固拍打板子以確保其干燥。

8. 向每個孔中準確移液130 μL的LIA工作底物溶液。（建議使用多通道移液管）。

9. 在加入底物后10-30分鐘內，在微孔板化學發光儀上測量每個孔的相對發光單位（RLUs）。

典型校準器曲線

僅示例曲線。請勿用于計算結果。

文獻參考：

1. Winter SJ, et al. The Analog Free Testosterone Assay: Are the Results in Men ClinicallyUseful. Clin Chem. 1998; 44(10):2178–82.

2. Ooi DS, et al. Establishing Reference Interval for DPC’s Free TestosteroneRadioimmunoassay. Clin Biochem. 1998; 31(1):15–21.

3. Marcus GJ, Dumford R. A Simple Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Testosterone.Steroids. 1985; 46:975–86.

4. Joshi UM, et al. A Sensitive Specific Enzyme Immunoassay for Serum Testosterone.Steroids. 1979; 34(1):35–46.

ALPCO產品種類多樣，可測樣品來源包括人、大/小鼠、豚鼠、兔、豬、羊、狗、猴等，涉及神經生物學、骨代謝、心血管疾病和氧化應激、細胞因子與信號轉導、糖尿病和肥胖癥、內分泌學、甲狀腺功能、腸胃病學、免疫學、生殖激素、抗體和抗原、分子診斷等多個研究領域，尤以糖尿病和肥胖癥研究領域見長。

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