小鼠抗ssDNA IG（總（A+G+M））ELISA試劑盒的結果計算方案

小鼠抗ssDNA總Ig ELISA試劑盒是一種免疫測定試劑盒適用于定量或滴定總抗體活性（IgG、IgA以及IgM），其對血清或血漿中的ssDNA具有特異性。其他生物可以驗證包括組織培養基在內的流體的使用。

小鼠抗ssDNA IG（總（A+G+M））ELISA試劑盒檢測原理：

鼠抗單鏈DNA總Ig ELISA試劑盒基于小鼠抗單鏈DNA IgG、IgA和IgM與微孔板上固定的單鏈DNA的結合，通過抗小鼠IgG+IgA+IgM-HRP偶聯物檢測總抗單鏈DNA抗體。經過洗滌步驟后，加入顯色底物（TMB）并產生顏色（藍色），該顏色與樣本中存在的抗單鏈DNA Ig的量成正比。加入終止液以終止反應（將藍色轉為黃色），然后使用ELISA讀數器測量A450nm。樣本中總小鼠抗體的活性是相對于校準物計算的。

艾美捷小鼠抗ssDNA IG（總（A+G+M））ELISA試劑盒：

貨號：ADI-5310

特異性：使用純化的單鏈DNA涂層微孔板；因此，該檢測專門針對針對單鏈DNA的抗體?？剐∈驣gG+IgA+IgM (H+L) HRP偶聯物與結合到板上單鏈DNA的小鼠IgG、IgA和IgM類抗體反應。IgE抗體不會在背景信號之上被測量。

檢測靈敏度：單鏈DNA涂層水平、HRP偶聯物濃度和低非特異性結合樣本稀釋液被優化，以區分小鼠血清樣本稀釋1:100后抗單鏈DNA Ig與背景（非抗體）信號。

試劑盒內容：如果未開封，微孔板和其他所有試劑在2-8攝氏度下穩定，直至盒標簽上打印的有效期。工作溶液的穩定性在試劑準備部分指明。

結果計算：

方法：樣品稀釋曲線的滴度

建議從每個樣品的稀釋曲線計算抗體活性的滴度作為最準確的定量方法。使用以下指南可以獲得最佳的精確度：

1. 使用處于檢測中段范圍的OD值指數（2.0 – 0.5 OD）；這為比較實驗組和重復實驗提供了最佳的靈敏度和可重復性。常用的任意1.0 OD值。

2. 準備每個樣品的連續稀釋，以產生高于和低于所選指數的信號。如果稀釋準確，每個樣品運行至少4個稀釋級時，可能不需要重復實驗。

3. 5倍稀釋方案有助于有效覆蓋產生高于和低于1.0 OD的廣泛范圍。稀釋方案可以收緊到3倍或2倍，以獲得更精確的比較數據。

4. 可以使用處于中OD范圍的校準值（例如，200 U/ml）來標準化不同檢測間的值。

計算方法：

1. 在以樣品稀釋倒數的對數尺度為x軸的圖表上，繪制每個陽性樣品的兩個稀釋級的OD值，這些樣品的OD值高于和低于所選指數的OD值（任意或選定的校準器）。

2. 從兩點之間繪制的直線上，讀取與所選指數的OD值相對應的稀釋值（x軸）= 總Ig抗體活性單位

示例：

使用1.0 OD指數來確定4種抗體的滴度。

滴度值

樣品A = 1.72 kU

樣品B = 5.70 kU

樣品C = 1.85 kU

樣品D = 7.90 kU