人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒樣本的收集和處理方案

人β防御素2（hBD-2）ELISA試劑盒是一種夾心ELISA試劑盒用于定量BD-2人細胞培養物和適當合格的來自血清、唾液或其他組織液的樣本。For僅供研究使用（RUO）；不用于治療或診斷使用。

人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒檢測原理：

人類β防御素2（Human Beta Defensin 2，BD-2）ELISA試劑盒基于樣品中的人類β防御素2與兩種抗體的結合，一種固定在微孔板井中，另一種與生物素結合，隨后與鏈霉親和素辣根過氧化物酶（HRP）偶聯物結合。經過洗滌步驟后，加入顯色底物，并通過HRP在TMB底物上的酶促反應產生顏色，該顏色與樣品中存在的BD-2量成正比。加入終止液以終止反應，然后使用ELISA微孔板讀數器測量450nm處的吸光度。樣品中BD-2的濃度是根據指定濃度的純化重組人類BD-2的標準曲線計算得出的。

艾美捷人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒：

貨號：ADI-100-250-BD2

儲存和穩定性：如果未開封，微孔板和其他所有試劑在2-8攝氏度下穩定，直至標簽上打印的有效期。工作溶液的穩定性在試劑準備部分指明。

特異性：本試劑盒中使用的抗體經過親和純化，使用純化的重組人類BD-2免疫吸附劑，并已通過ELISA顯示特異性與hBD-2反應，基本上不與重組hBD-1、hBD-3或hNP1反應。

需自備的材料：

- 能夠提供100微升和1-10毫升的移液器和移液管。推薦使用多通道移液器。

- 用于稀釋樣本和抗體HRP濃縮液的一次性玻璃或塑料5-15毫升管。

- 用于稀釋洗滌濃縮液的量筒；0.2至1升。

- 用于儲存稀釋洗滌液的儲液瓶；200毫升至1升。

- 用于稀釋試劑濃縮液的蒸餾水或去離子水。

- 450納米波長的微孔板讀數器。

人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒樣本收集和處理：

培養基、生物加工制劑、血清和其他生物液體在適當稀釋以避免溶液基質干擾的情況下可以使用作為樣本。對于血清，通過靜脈采血，允許凝血，并在室溫下通過離心分離血清。對于所有樣本，在用樣本稀釋液稀釋之前，通過離心和/或過濾澄清。如果樣本不會立即檢測，可冷藏保存數周，或冷凍長期保存。

結果計算：

結果可以使用任何免疫分析軟件包進行計算。推薦使用四參數曲線擬合。如果沒有軟件可用，BD-2濃度可以按照以下方式確定：

1. 計算重復樣本的平均OD值。

2. 在坐標紙上，將標準品的平均OD值（y軸）與BD-2的濃度（pg/ml）（x軸）繪制出來。通過這些點繪制最佳擬合曲線，構建標準曲線。點對點構建是最常見和可靠的方法。

3. 通過插值從標準曲線確定未知樣本和對照物中的BD-2濃度。

4. 將樣本獲得的值乘以每個樣本的稀釋因子。

5. 產生信號高于200 pg/ml標準品的樣本應進一步稀釋并重新檢測。

人β-防御素-2（BD-2）elisa試劑盒典型結果：

Wells Standards, Control & Samples A450 pg/ml

A1, A2 Negative Diluent Control 0.04 0

B1, B2 6.25 pg/ml Standard 0.21 6.25

C1, C2 12.5 pg/ml Standard 0.36 12.5

D1, D2 25 pg/ml Standard 0.69 25

E1, E2 50 pg/ml Standard 1.39 50

F1, F2 100 pg/ml Standard 2.49 100

G1, G2 200 pg/ml Standard 3.21 200

H1, H2 Sample [Diluted 1:10] 1.55 68

Calculated: 10-fold dilution x 68 pg/ml = 680 pg/ml in serum