山羊抗小鼠IgG1重鏈-HRP偶聯多克隆抗體：HRP直接標記，省時高效

一、產品概述

由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的山羊抗小鼠IgG1重鏈-HRP偶聯多克隆抗體（貨號：A90-105P）為辣根過氧化物酶（HRP）直接偶聯的山羊抗小鼠IgG1重鏈特異性多克隆抗體，經固相吸附處理和親和純化，確保對小鼠IgG1亞型的高選擇性識別。該抗體適用于酶聯免疫吸附測定（ELISA）、免疫細胞化學（ICC）、免疫組織化學（IHC）和蛋白質印跡（WB）等多種檢測平臺。HRP的直接偶聯省去了二抗孵育步驟，可顯著簡化實驗流程并降低非特異性背景。產品濃度為1 mg/ml，HRP與抗體的摩爾比為4:1，提供高靈敏度的信號放大能力。

二、關鍵規格

參數 | 詳細信息

靶標 | 小鼠IgG1重鏈

反應性 | 小鼠

應用 | ELISA, ICC, IHC, WB

宿主 | 山羊

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

同型 | 山羊IgG

偶聯物 | HRP（辣根過氧化物酶）

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 小鼠

濃度 | 1 mg/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | 磷酸鹽緩沖液（PBS），含0.2% BSA和0.05% Pro-Clean 400

三、分子生物學背景

小鼠免疫球蛋白G1（IgG1）是小鼠血清中含量最高的IgG亞型之一。IgG1具有以下重要特性：

胎盤轉運：能夠通過胎盤屏障，為胎兒提供被動免疫。

Fc受體結合：與Fc受體結合能力強，介導調理吞噬和抗體依賴性細胞介導的細胞毒性（ADCC）。

補體激活：有效激活補體經典途徑，參與病原體清除。

在實驗應用中，小鼠IgG1是單克隆抗體最常用的亞型之一。本抗體特異性識別小鼠IgG1的重鏈，適用于檢測小鼠來源的IgG1型一抗，或對小鼠IgG1亞型進行定量和定性分析。

四、產品特性與質量控制

亞型特異性

本抗體經固相吸附（solid phase adsorbed）處理，并通過親和層析純化，確保對小鼠IgG1的高度選擇性。經免疫電泳和ELISA驗證：

特異性反應：與小鼠IgG1重鏈特異性結合。

交叉反應性：與小鼠IgA、IgM、IgG2a、IgG2b、IgG2c、IgG3及IgE的交叉反應率低于1%。

異常情況提示：部分雜交瘤克隆可能表達異常的免疫球蛋白相關肽段，可能導致與本抗體的非預期識別，建議在使用前驗證特定克隆的反應性。

HRP偶聯特性

偶聯方法：抗體經親和純化后，與辣根過氧化物酶（HRP）通過化學交聯偶聯。

摩爾比：HRP與抗體的摩爾比為4:1，確保每個抗體分子攜帶多個酶分子，提供較強的信號放大能力。

濃度測定：偶聯前采用比爾定律測定免疫球蛋白濃度（1 mg/ml IgG在A280處吸光度為1.4）。

穩定劑與防腐劑

緩沖液為磷酸鹽緩沖液（PBS），含：

0.2% BSA：牛血清白蛋白作為穩定劑，防止抗體在低濃度下非特異性吸附，并增強儲存穩定性。

0.05% Pro-Clean 400：一種廣譜防腐劑，替代疊氮化鈉，因其不抑制HRP活性，適用于酶偶聯抗體。

五、儲存與穩定性

保存條件：2–8°C，嚴禁冷凍。冷凍會導致蛋白變性和HRP活性喪失。

有效期：自收貨之日起1年，在未受污染且正確儲存條件下。

注意事項：本抗體含HRP，避免接觸強氧化劑或金屬離子。Pro-Clean 400作為防腐劑，在推薦濃度下對細胞培養實驗可能有影響，但用于固定樣本的ICC/IHC無影響。

六、應用與推薦稀釋度

重要提示：制造商未對所列全部應用進行逐一驗證，以下稀釋度為基于同類抗體的推薦起始范圍，用戶需根據具體實驗體系進行優化。

酶聯免疫吸附測定（ELISA）

推薦稀釋范圍：1:10,000 – 1:100,000

操作說明：用于檢測包被或捕獲的小鼠IgG1型抗體。建議使用封閉液（如1% BSA-PBS或5%脫脂牛奶-PBS）稀釋抗體。加入TMB或ABTS等HRP底物顯色。

優化建議：從1:20,000起始，根據信號強度調整。高靈敏度需求時可使用1:10,000；若背景偏高，可提高至1:50,000以上。

免疫組織化學（IHC）

推薦稀釋范圍：1:200 – 1:2,000

樣本類型：福爾馬林固定石蠟包埋（FFPE）組織切片或冰凍切片。

操作說明：適用于檢測組織切片中小鼠IgG1型一抗的結合。需注意內源性過氧化物酶的封閉（如3% H2O2處理10–15分鐘）。

優化建議：起始稀釋度1:500。孵育時間室溫1–2小時或4°C過夜。DAB或AEC顯色。

免疫細胞化學（ICC）

推薦稀釋范圍：1:200 – 1:2,000

樣本類型：培養細胞（固定和透化處理后）。

操作說明：與IHC類似，需封閉內源性過氧化物酶。適用于檢測細胞爬片或培養板中一抗的結合。

優化建議：起始稀釋度1:500。若信號弱，可降至1:200；若背景高，升至1:2,000。

蛋白質印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:2,000 – 1:20,000

操作說明：用于檢測膜上小鼠IgG1型一抗識別的目標蛋白。本抗體識別一抗的重鏈（約55 kDa），因此在非還原或還原條件下均可使用。

注意事項：當檢測免疫沉淀產物或細胞裂解液中的一抗時，目標蛋白可能位于IgG重鏈附近。由于本抗體為HRP直接偶聯，無需二抗孵育，可顯著縮短實驗時間。

優化建議：起始稀釋度1:5,000。使用化學發光底物（如ECL）檢測。注意：本抗體識別的是小鼠IgG1重鏈，而非輕鏈，因此不會產生約25 kDa的輕鏈信號。

七、相關產品推薦

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