兔抗PML抗體親和純化：用于免疫沉淀及免疫組化研究

一、產品概述

PML（早幼粒細胞白血病蛋白）是一種多功能蛋白，屬于RBCC/TRIM家族成員，具有RING指結構域、B-box和卷曲螺旋結構域。PML參與腫瘤生長抑制、造血分化、基因轉錄、凋亡誘導及病毒免疫等多種生物學過程。PML基因常與視黃酸受體α基因發生染色體易位，形成的PML-視黃酸受體融合蛋白與急性早幼粒細胞白血病的發生密切相關。

本文介紹的由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的兔抗PML抗體（親和純化）（貨號：A301-167A）是一款針對人源PML蛋白的高特異性多克隆抗體，適用于免疫組化、免疫沉淀和免疫印跡等多種應用場景。

二、產品規格

參數 詳細信息

靶標 PML

反應種屬 人

宿主 兔

克隆類型 多克隆

抗體形式 完整IgG

免疫原 PML蛋白400-450位氨基酸區域內的表位（具體映射至NP_150241.2編號下殘基375-425之間）

同種型 IgG

偶聯物 未偶聯

純度 抗原親和純化

抗原種屬 人

濃度 200 ug/mL

儲存條件 2–8°C

保質期 自收到之日起1年

緩沖液 Tris緩沖鹽水，含0.1% BSA及0.09% 疊氮化鈉 |

生產流程 使用固定在固相載體上的PML特異性表位進行親和純化 |

濃度測定方法：采用比爾定律測定免疫球蛋白濃度，其中1 mg/mL IgG在A280下的吸光度為1.4。

三、推薦應用與實驗條件

本抗體經驗證可用于以下三種應用類型，推薦稀釋比例及關鍵實驗條件如下。

3.1 免疫印跡（Western Blot, WB）

推薦稀釋范圍：1:2,000 – 1:10,000

封閉及抗體稀釋液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育條件：過夜孵育

二抗選擇：

檢測細胞裂解液：使用山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（貨號A120-101P）

檢測免疫沉淀樣品：使用抗兔IgG輕鏈HRP偶聯抗體，封閉緩沖液中需添加5%正常豬血清（貨號S100-020）

3.2 免疫組化（Immunohistochemistry, IHC）

推薦稀釋范圍：1:500 – 1:2,000

抗原修復：推薦使用pH 6.0的檸檬酸緩沖液進行熱誘導抗原修復（適用于福爾馬林固定、石蠟包埋組織切片）

3.3 免疫沉淀（Immunoprecipitation, IP）

推薦用量：6 ug 抗體 / mg 細胞裂解物總蛋白

四、儲存與穩定性

儲存溫度：2–8°C

有效期：自收到之日起1年內，按照指示條件儲存可保持最佳性能

緩沖液成分說明：含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。請注意，疊氮化鈉會干擾某些酶標記檢測系統（如HRP），若后續使用HRP偶聯二抗，需在實驗前通過透析或脫鹽去除疊氮化鈉

避免反復凍融：建議分裝保存，避免多次凍融導致抗體活性下降

五、背景信息

5.1 PML蛋白的結構與功能

PML（早幼粒細胞白血病蛋白）是RBCC/TRIM家族成員，其結構特征包括：

RING指結構域：介導蛋白-蛋白相互作用及E3泛素連接酶活性

B-box結構域：參與鋅離子結合和蛋白折疊

卷曲螺旋結構域：介導同源或異源二聚體形成

PML在細胞核內形成名為“PML核體”的亞核結構，該結構是多種信號通路的整合平臺。PML參與以下關鍵生物學過程：

腫瘤生長抑制

造血細胞分化

基因轉錄調控（作為轉錄共調節因子）

凋亡誘導

抗病毒免疫應答

5.2 PML與疾病的關系

急性早幼粒細胞白血?。篜ML基因與視黃酸受體α基因發生染色體易位t(15;17)(q24;q21)，產生PML-RARA融合蛋白。該融合蛋白干擾正常PML核體形成及視黃酸信號通路，導致早幼粒細胞分化阻滯和惡性增殖。全反式維甲酸和三氧化二砷可通過靶向降解PML-RARA融合蛋白實現治療作用。

其他疾?。篜ML功能異常也見于實體瘤、自身免疫性疾病及病毒感染等病理狀態。