兔抗LEDGF/p75親和純化抗體：批次穩定，精準靶向

一、產品概述

由艾美捷Bethyl Laboratories推出的本品為兔源抗LEDGF/p75多克隆抗體（貨號：A300-848A），經抗原親和純化制備，以未標記的完整IgG形式提供。該抗體特異性識別人類LEDGF/p75蛋白（轉錄共激活因子p75/p52），適用于免疫沉淀（IP）和蛋白質印跡（WB）應用，是研究轉錄調控、神經發生及慢病毒整合機制的重要工具。

二、核心產品參數

參數項目 具體規格

靶標蛋白 LEDGF/p75

反應種屬 人

宿主來源 兔

克隆類型 多克隆

抗體形式 完整IgG

免疫原區域 介于480位氨基酸與C末端之間

抗體亞型 IgG

標記類型 未標記

純化方式 抗原親和純化

抗原種屬 人

工作濃度 200 ?g/ml

保存溫度 2 - 8 °C

有效期 自收貨之日起1年

緩沖體系 含0.1% BSA和0.09%疊氮化鈉的Tris緩沖鹽水

三、推薦應用與實驗條件

3.1 應用稀釋度匯總

應用技術 推薦用量/稀釋度 備注

免疫沉淀（IP） 6 ?g / mg 裂解物 每毫克總蛋白使用6微克抗體

蛋白質印跡（WB） 1:2000 - 1:10,000

3.2 蛋白質印跡（WB）專用實驗條件

通用條件：

封閉液及抗體稀釋液：5% 牛奶-TBST

一抗孵育方式：過夜孵育

細胞裂解物Western Blot：

推薦二抗：山羊抗兔IgG重鏈和輕鏈抗體（貨號A120-101P）

免疫沉淀產物的Western Blot：

推薦二抗：抗兔IgG輕鏈HRP標記抗體

封閉液補充：需添加5%正常豬血清（貨號S100-020）

*注：使用輕鏈特異性二抗可避免檢測免疫沉淀中抗體的重鏈信號干擾。*

四、免疫原與表位信息

4.1 免疫原區域

本抗體免疫原對應人LEDGF/p75蛋白第480位至C末端之間的區域。依據NP_150091.2（GeneID 11168）的編號體系，該蛋白全長530個氨基酸，因此表位映射在480–530位氨基酸之間。

4.2 表位位置

抗體識別的特異性表位位于靠近C末端的功能區域。該區域對于轉錄共激活活性及與整合酶等蛋白的相互作用具有重要生物學意義。

五、生產與純化工藝

5.1 親和純化

采用固定于固相載體上的LEDGF/p75特異性表位進行親和層析純化，確?？贵w針對目標表位具有高特異性。

5.2 濃度測定

免疫球蛋白濃度采用比爾定律（Beer’s Law）測定，計算依據為：1 mg/ml IgG溶液在280 nm波長處的吸光度值為1.4。

六、儲存與穩定性

推薦儲存條件：2°C至8°C冷藏，切勿冷凍

有效期：自收貨之日起1年

緩沖液成分：Tris緩沖鹽水，含0.1%牛血清白蛋白（BSA）和0.09%疊氮化鈉

運輸建議：冷藏運輸，避免反復溫度波動

七、LEDGF/p75靶標背景信息

7.1 功能概述

LEDGF/p75（Lens Epithelium Derived Growth Factor / Transcriptional Coactivator p75）是一種多功能的轉錄共激活因子，參與以下關鍵生物學過程：

1. 晶狀體上皮細胞基因調控：最早在晶狀體上皮細胞中被鑒定，參與晶狀體發育相關基因的表達調節

2. 神經上皮干細胞分化：在神經上皮干細胞分化過程中發揮重要作用

3. 神經發生：參與神經元的生成與發育過程

4. 慢病毒與HIV整合：作為輔助因子，促進慢病毒和HIV病毒DNA整合入宿主細胞基因組

7.2 別名信息

CLL-associated antigen KW-7；dense fine speckles 70 kDa protein（DFS 70）；DFS70；LEDGF；lens epithelium-derived growth factor；p52；p75；PAIP；PC4 and SFRS1-interacting protein；PSIP2；transcriptional coactivator p52/p75；Transcriptional coactivator p75/p52

備注：該蛋白存在p75和p52兩種亞型，均由PSIP1基因編碼，本抗體可識別p75亞型。

八、使用注意事項

1. 疊氮化鈉警示：緩沖液含0.09%疊氮化鈉，操作時請佩戴適當防護裝備

2. BSA說明：緩沖液中含0.1% BSA，可作為載體蛋白穩定抗體

3. IP用量計算：推薦用量為6 ?g抗體/mg總蛋白裂解物，請根據樣本蛋白總量精確計算

4. 二抗選擇關鍵：

檢測細胞裂解物WB時，可使用識別重鏈和輕鏈的二抗

檢測IP產物WB時，強烈建議使用抗兔IgG輕鏈HRP標記二抗，并添加5%正常豬血清以降低背景，避免IgG重鏈（約55 kDa）的干擾信號

5. 過夜孵育要求：WB實驗中一抗需過夜孵育，請勿縮短孵育時間以確保檢測靈敏度

*本說明書基于產品特性研究編寫，使用者應結合具體實驗體系進行優化驗證。