抗beta Actin兔多克隆抗體（A300-491A），行業標桿級內參抗體

一、產品概述

beta Actin（β-肌動蛋白）是真核細胞中普遍表達的高度保守的細胞骨架蛋白，廣泛用作Western Blot、IHC等實驗的內參對照。由艾美捷代理Bethyl Laboratories推出的本產品（A300-491A）為針對人beta Actin N端區域的兔多克隆抗體，經抗原親和純化，可同時識別人和小鼠來源的beta Actin。初步數據表明，該抗體還可識別高度同源的gamma Actin。產品適用于免疫組織化學（IHC）和蛋白質印跡（WB），具有極高的檢測靈敏度（WB稀釋比高達1:25,000），是蛋白表達定量和細胞結構研究的理想內參工具。

二、關鍵規格

參數 | 詳細信息

靶標 | beta Actin

反應性 | 小鼠、人

應用 | IHC, WB

宿主 | 兔

克隆性 | 多克隆

形式 | 完整IgG

免疫原 | 第1–50位氨基酸（N端）

同型 | IgG

偶聯物 | 未偶聯

純度 | 抗原親和純化

抗原種屬 | 人

濃度 | 1000 ug/ml

保存條件 | 2 – 8 °C

有效期 | 收貨后1年

緩沖液 | Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液，pH 7-8，含0.09%疊氮化鈉

三、分子生物學背景

beta Actin（基因名ACTB，Gene ID 60，Uniprot P60709）是六種高度保守的肌動蛋白異構體之一，在真核細胞中普遍表達。作為細胞骨架的主要組成部分，beta Actin具有以下核心功能：

維持細胞結構：形成微絲網絡，賦予細胞機械強度和形態。

調控細胞運動：參與細胞遷移、分裂、胞質分裂及細胞連接形成。

信號轉導：與多種信號蛋白相互作用，影響基因表達和細胞命運。

由于beta Actin在各組織、各發育階段及多種實驗條件下表達水平相對穩定，它被廣泛用作蛋白質印跡（WB）和免疫組織化學（IHC）中的上樣對照或內參，用于校正蛋白定量和檢測體系的一致性。

注意：本抗體免疫原為beta Actin N端第1–50位氨基酸。該區域在beta Actin與gamma Actin（基因ACTG1）之間高度保守，因此初步數據顯示A300-491A也可能識別gamma Actin（Gene ID 71）。在解釋實驗結果時需考慮此交叉反應性。

別稱：細胞質肌動蛋白1、beta細胞骨架肌動蛋白、BRWS1、PS1TP5結合蛋白1等。

四、儲存與穩定性

抗體以1000 ug/ml濃度提供于Tris-檸檬酸鹽/磷酸鹽緩沖液（pH 7-8）中，含0.09%疊氮化鈉作為防腐劑。收到后請于2–8°C條件下垂直保存，切勿冷凍。冷凍會導致蛋白變性和聚集，影響抗體結合活性。在正確儲存條件下，自收貨之日起可穩定保存1年。

重要提示：疊氮化鈉會抑制辣根過氧化物酶（HRP）活性。若后續使用HRP偶聯二抗進行化學發光檢測，請確保洗滌步驟充分；如需完全去除疊氮化鈉，可使用脫鹽柱或透析。

應用與推薦工作條件

蛋白質印跡（WB）

推薦稀釋范圍：1:10,000 – 1:25,000（超高靈敏度）

封閉與抗體稀釋液：5%脫脂牛奶-TBST

一抗孵育：過夜孵育（推薦4°C）

推薦二抗：山羊抗兔IgG（重鏈+輕鏈）抗體（貨號A120-101P）

五、性能特點

beta Actin在常見細胞裂解液（如HeLa、HEK293T、NIH/3T3）中表達豐度極高，通常僅需5–10 ug總蛋白即可獲得強信號。

稀釋度1:25,000已足以檢測大多數樣品中的內源性beta Actin。對于特別豐富的樣品，可進一步稀釋至1:50,000。

超高稀釋比意味著極低的抗體消耗：一支100 ul抗體（1000 ug/ml，即100 ug總量）可制備高達2,500 ml工作液（按1:25,000計算），顯著降低單次實驗成本。

六、優化建議

起始稀釋度：建議從1:20,000開始。若信號過強（出現飽和或背景彌散），可提高至1:25,000或更高；若信號偏弱，可降至1:10,000。

上樣量：對于全細胞裂解液，建議上樣5–20 ug總蛋白。過高的上樣量可能導致信號飽和，不適合作為定量內參。

曝光時間：由于beta Actin豐度高，化學發光曝光時間通常很短（數秒至1分鐘），注意避免過曝導致條帶合并。

七、注意事項

1. 研究用途限制：本產品僅供生命科學研究使用，不得用于臨床診斷、治療或人體相關應用。

2. 安全操作規范：緩沖液含0.09%疊氮化鈉，操作時請佩戴實驗手套和護目鏡，避免皮膚接觸或吸入。

3. 交叉反應性說明：本抗體可同時識別beta Actin和gamma Actin，在需要特異性區分兩種異構體的實驗中請謹慎使用。

4. 批次驗證：盡管濃度已標準化為1000 ug/ml，不同批次間可能存在細微差異，建議收到新抗體后進行稀釋度驗證。

本抗體憑借其超高的檢測靈敏度（WB高達1:25,000）、人鼠跨物種反應性以及明確優化的IHC修復條件，是蛋白表達定量、細胞定位研究以及多實驗室數據標準化中的可靠內參工具。