Biogradetech改良Masson三色染色液染色程序說明

在狹義上，結締組織是指它所包含的三種纖維：膠原纖維、網狀纖維和彈性纖維，其中膠原纖維分布最廣、含量最豐富。Masson三色染色被稱為Masson染色法，是結締組織染色最經典的方法之一，也是權威的以及膠原纖維染色的經典技術。術語“三色染色”通常是指對細胞進行染色細胞核，并選擇性地顯示膠原纖維和肌肉纖維。這種方法的染色原理與陰離子染料分子的大小和組織滲透性：較小的分子可以很容易地滲透致密和低滲透性組織，而較大的分子只能進入結構松散和高滲透性組織。然而，苯胺藍分子量大，因此Masson染色后，肌肉纖維呈現紅色，膠原蛋白纖維呈現綠色（淺綠色）或藍色（苯胺藍）。

艾美捷改良Masson三色染色液基本參數：

目錄號：A-CSH274

規格：8×50mL

儲存：在2~8°C的黑暗中儲存（12個月）

程序：

1.將組織固定在10%福爾馬林固定劑中，然后常規脫水和包埋。切片被切割成4μm的厚度，然后進行常規的脫蠟直至脫水。

2.將切片置于Bouin溶液中，在室溫下孵育過夜或置于37°C的培養箱中孵育2小時進行媒介化。然后，用自來水沖洗切片，直到切片上的黃色消失。

3.切片用天青石藍染色溶液染色2-3分鐘，然后進行短暫的水洗。

4.切片用Mayer蘇木精染色溶液染色2-3分鐘，然后進行短暫的水洗。

5.切片在酸-醇分化溶液中分化幾秒鐘，然后用水沖洗10分鐘

6.切片用胭脂紅染色液染色10分鐘，然后用蒸餾水漂洗。

7.將切片用磷鉬酸水合物溶液處理約10分鐘。

8.倒出上清液，在不用水沖洗的情況下，將切片直接用苯胺藍染色溶液染色5分鐘。

9.將切片用弱酸溶液處理2分鐘。

10.使用95%乙醇進行快速脫水。切片在100%乙醇中脫水三次，每次5-10秒。

11.切片在二甲苯中清洗三次，每次清洗1-2分鐘。最后，使用中性安裝介質進行密封

改良Masson三色染色液供應材料和儲存條件：

注：

1.應盡可能徹底地對各部分進行除石蠟處理。酸性醇的分化時間應根據切片的厚度、組織類型及其年齡來確定。

2.磷鉬酸的作用有兩個：一方面，它將染紅的膠原纖維區分為無色或淡紅色，同時使肌肉纖維和纖維素仍呈現鮮紅色；另一方面，它作為膠原纖維的媒染劑，促進它們與苯胺藍染色溶液的結合。

3.苯胺藍染色后用弱酸溶液處理，目的是去除細胞質中的藍色，使染色生動清晰。對于用Zenker溶液固定的組織，弱酸溶液的處理時間可以延長到5分鐘。

4.弱酸性溶液可提高色彩的清晰度和生動性。如果需要大量，可以制備0.1-0.3%的乙酸溶液作為替代品。

該試劑僅用于科學研究領域，不適用于臨床診斷或其他用途。

Biogradetech生命科學和醫藥研發行業關鍵原料與試劑的供應商：Biogradetech成立于2015年，總部位于美國加利福尼亞州，早期以產品技術研發服務起家，逐步發展了廣泛的產品線，并將其商業化銷售，包括蛋白質、抗體、酶、培養基、試劑盒和儀器。適用于細胞生物學、蛋白質組學、分子生物學、免疫學、微生物學、診斷學、生物化學、神經科學、血液分析和高通量藥物篩選等領域。