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特色產品LIVE Step?細胞檢測系統專為高通量、均勻、靈敏的發光定量代謝活性活哺乳動物細胞而設計。它由一種即用型溶液組成,可一步裂解細胞并測量培養物中存在的ATP量。檢測在>100000個懸浮細胞和>50000個貼壁細胞之間呈線性,R2值大于0.99。信號穩定時間超過5小時(T1/2>300分鐘),允許實驗靈活性。該產品與多種介質配方和酚紅的存在相容,在多次凍融循環后穩定。

圖1:ATP存在下的螢光素活性。
在Mg2+、O2和ATP存在下,從裂解的代謝活性細胞釋放的熒光素會產生發光信號。產生的信號與裂解前培養物中存在的代謝活性活細胞的數量成正比。
貨號:82648
同義詞:細胞活性試劑盒、細胞活性測定、熒光素酶
未提供但需要的材料
與所使用的儀器兼容的透明底部白色多孔組織培養板
感興趣的哺乳動物細胞培養
細胞培養基
旋轉搖床
熒光素酶測定儀
ATP溶液(可選)
儲存/穩定性:
如果按照說明儲存材料,試劑在收到后6個月內將表現最佳。首次解凍后,分裝儲存于-20°C。試劑可以經受幾次凍融循環而不影響功能,但建議盡可能避免凍融循環。
應用:
使用標準曲線,通過測定ATP水平來確定哺乳動物培養中代謝活躍、存活的細胞值。
運輸溫度:-80°C
禁忌癥:
培養中有機溶劑或其他化合物的存在可能導致熒光素酶抑制并影響讀數。
如果使用有機溶劑或其他化合物,建議先進行初步測試以確定化合物單獨的影響。例如,準備一個反應包含LIVE-Step?細胞測定溶液、1 ?M ATP和用于準備化合物的稀釋試劑,以及一個反應包含LIVE-Step?細胞測定溶液、1 ?M ATP和感興趣的化合物在稀釋試劑中的最大濃度。如果觀察到信號減少,可能需要對化合物進行滴定,以評估無影響的值,或對每個測試濃度使用對照。
建議不要使用板的邊緣孔,以避免可能影響信號的溫度梯度。
在進行測定時使用無菌技術,避免在培養基中添加細胞外ATP,以避免ATP污染。
避免在儲存過程中將試劑暴露于光線和過度熱量。
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