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特色產品PDE3A測定試劑盒是一種熒光偏振(FP)均質96孔板試劑盒,專為篩選和鑒定PDE3A(磷酸二酯酶3A)抑制劑而設計。該測定利用了一種特定的熒光磷酸鹽結合納米顆粒。試劑盒包含足夠的純化重組PDE3A(氨基酸669-1141(末端))、熒光探針、PDE測定緩沖液、結合劑以及稀釋液,可供100次反應使用。
測定使用了標記有熒光素的環化腺苷酸單磷酸(cAMP-FAM用于PDE3A),其中磷酸基團嵌入在環狀核苷酸中。這是一種非常小的分子,旋轉速度快(低FP)。PDE3A催化環狀核苷酸中磷酸二酯鍵的水解,釋放出磷酸基團。在第二步中,游離的磷酸基團被一種特定的磷酸鹽結合納米珠(結合劑)識別,形成一個大復合物,其運動受限(高FP)。FP與PDE3A活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PDE3A檢測試劑盒:
貨號:79736
同義詞:磷酸二酯酶3A,PDE3A,PDE3-A,PDE
試劑盒格式:熒光偏振
物種:人
提供方式:試劑盒包含足夠的純化重組PDE3A(氨基酸669-1141(末端))、熒光探針、PDE測定緩沖液、結合劑以及稀釋液,可供100次反應使用。
所需材料但未提供:
-可調節微量移液器及無菌吸頭
-旋轉或搖動平臺
-能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器(λex=470(5nm帶寬)和在λem=528(10nm帶寬)處檢測)
儲存/穩定性:當按照指示儲存時,該測定試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。
使用說明:請參閱試劑盒說明書以獲取詳細操作步驟。
應用:用于研究酶動力學,并在高通量篩選(HTS)應用中篩選小分子抑制劑以進行藥物發現。
運輸溫度:-80°C
僅用于研究
檢測結果示例:

圖:西洛他唑對PDE3A的抑制作用。在200nMFAM-環化-3',5'-AMP底物存在的情況下,PDE3A與西洛他唑的不同濃度進行孵育。使用TecanM1000熒光微孔板讀取器測量熒光偏振。結果以活性百分比表示,其中在沒有抑制劑(陽性對照)的情況下,FP被設定為100%。
文獻參考:
Kamel R., et al., 2023 Nat Rev Cardiol 20(2):90-108.
Nazir M., et al., 2017 Exp Cell Research 361(2):308-315.

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