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特色產品PARPtrap? PARP1和PARP2聯合檢測試劑盒是一種均質熒光偏振(FP)檢測,旨在用于高通量篩選(HTS)格式中測量PARP1(聚(ADP-核糖)聚合酶1)和PARP2(聚(ADP-核糖)聚合酶2)DNA復合物的形成,從而實現對PARP1/2捕獲的測量。該試劑盒采用便捷的384孔板格式,包含足夠進行400次酶反應的純化重組PARP1酶、PARP2(氨基酸2-583)、熒光標記的寡核苷酸雙鏈、NAD?和PARPtrap?檢測緩沖液。
熒光標記的寡核苷酸雙鏈是小型熒光探針,可以在溶液中自由旋轉,因此具有較低的熒光偏振(FP)。在沒有核糖基化的情況下,PARP1/2與其熒光探針結合,形成一個較大的復合物。在NAD?存在的情況下,PARP1/2發生自身核糖基化并從熒光寡核苷酸雙鏈上解離,隨后可以再次自由旋轉(低FP)。在PARP1/2抑制劑存在的情況下,PARP1/2可以被“捕獲”在熒光寡核苷酸雙鏈上,從而導致較高的FP。FP信號的增加與PARP1/2的捕獲成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PARPtrap -PARP1和PARP2聯合檢測試劑盒:
貨號:78317
同義詞:聚(ADP-核糖)聚合酶2、聚(ADP-核糖基)轉移酶2、ADPRT、PARP2、聚(ADP-核糖)聚合酶1、聚(ADP-核糖基)轉移酶、PARP1、PARP-1、PARP-2
試劑盒格式:熒光偏振
適用物種:人
靶點:PARP1、PARP2
儲存/穩定性:按照指示儲存時,該檢測試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。
應用:篩選能夠增強PARP1/2捕獲到DNA上的小分子,用于藥物發現和高通量篩選(HTS)應用,以及IC50的測定。
運輸溫度:-80℃
所需材料但未提供
無核酸酶蒸餾水
可調節微量移液器及無菌吸頭
旋轉或搖擺平臺
能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器(λex=470 nm(5 nm帶寬)和在λem=518 nm(10 nm帶寬)處檢測)
結果示例:

圖:Talazoparib、AZD5305、Olaparib和Veliparib對PARP1捕獲到DNA的影響。
在Talazoparib、Olaparib、Veliparib和AZD5305(#78318)濃度逐漸增加的情況下,測量PARP1捕獲到DNA上的情況?!盁o化合物”對應于“低FP對照”,“無NAD?”對應于“高FP對照”條件。
文獻參考:
Murai J., et al., 2014 Molecular Cancer Therapeutics 13: 433-443
Murai J., et. al., 2012 Cancer Research 72: 5588-5599
Zandarashvili L., et al., 2020 Science 368(6486): 6367
Marques M., et al., 2019 Oncogene 38 (12): 2177-2191.
Gui B., et al., 2019 Proc Natl Acad Sci USA 116 (29): 14573-14582.??

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