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特色產品人類IDO1細胞基檢測試劑盒旨在監測在培養細胞中外源表達的人類IDO1的活性。試劑盒包含一個可用于轉染的表達載體,用于全長人類IDO1(hIDO1)的表達。表達后,hIDO1能夠催化L-色氨酸(L-Trp)轉化為犬尿氨酸(Kyn),后者被釋放并在檢測介質中容易被檢測到。試劑盒還包含專門的檢測介質以及激活hIDO1所需的全部成分。
L-色氨酸(L-Trp)是一種必需氨基酸,對于哺乳動物細胞中的蛋白質合成必不可少,而L-Trp轉化為犬尿氨酸(Kyn)的途徑已被牢固確立為先天和適應性免疫的關鍵調節因子。L-Trp代謝為Kyn通過剝奪免疫細胞的L-Trp以及釋放具有免疫抑制功能的L-Trp降解產物,維持免疫抑制微環境。吲哚胺2,3-雙加氧酶(IDO1和IDO2)是這一途徑中的兩個限速酶,在許多腫瘤中被上調,為癌細胞提供了免疫逃逸的途徑。
艾美捷BPS Bioscience-IDO1細胞檢測試劑盒:
貨號:72031
同義詞:吲哚胺2,3-雙加氧酶1、IDO、IDO2、IDO檢測、IDO1檢測
適用物種:人類
儲存/穩定性:按照說明儲存時,自收到之日起至少6個月內穩定。試劑盒各組分需不同的儲存條件。請確保各組分到達后儲存于適當的溫度。
應用:在細胞環境中篩選hIDO1酶的抑制劑。注意:表達載體是為瞬時轉染協議設計的。它不適用于細菌中的轉化和擴增。
運輸溫度:-80°C(干冰)
警告:避免凍融循環。
所需材料(但試劑盒未提供):
HEK293細胞(或其他合適的哺乳動物細胞系)及相應的細胞培養基
96孔組織培養板
哺乳動物細胞系的轉染試劑
6.1 N三氯乙酸(Sigma #T0699)
冰醋酸(Sigma #320099)
透明96孔板
能夠在λ=470 490 nm處測量吸光度的分光光度計
INCB024360(BPS產品編號#27338),10 mM DMSO母液(可選的IDO1抑制劑參考品)
結果展示

圖:結果以吸光度百分比形式展示。未用抑制劑處理的hIDO1轉染細胞的歸一化吸光度設定為100%。INCB024360的IC50值約為6.9 nM。
文獻參考:
1. Yue, E., et al., J. Med. Chem. 2009; 52: 7364–7367.
2. Liu, X., et al., Blood. 2010; 115(17): 3520-3530.

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