BPS Bioscience PDE4D基于細胞的報告基因檢測試劑盒產品數據和文獻參考

磷酸二酯酶 (PDE) 在 cAMP 和 cGMP 信號傳導的動態調節中發揮著重要作用。PDE4D 具有 3',5'-環狀 AMP 磷酸二酯酶活性并降解 cAMP。PDE4D 抑制劑對 PDE4D 活性的抑制導致細胞內 cAMP 水平升高。PDE4D 基因編碼至少 9 種不同的亞型，并與中風、哮喘、心律失常和心肌病有關，使其成為重要的治療靶點。

基于PDE4D 細胞的活性測定旨在篩選培養細胞中的 PDE4D7 抑制劑。該測定基于用 CRE 熒光素酶報告基因轉染細胞。CRE 報告基因包含受 cAMP 反應元件 (CRE) 控制的螢火蟲熒光素酶基因。細胞內 cAMP 升高會激活 CRE 結合蛋白 (CREB) 與 CRE 結合并誘導熒光素酶的表達。在細胞生理學研究中，毛喉素通常用于提高細胞內 cAMP 水平。當瞬時轉染CRE報告基因的細胞被毛喉素激活時，細胞內cAMP水平上調，從而誘導CRE熒光素酶報告基因的表達。然而，當細胞用 PDE4D7 表達載體和 CRE 報告基因共轉染時，毛喉素誘導的 cAMP 水平降低，導致熒光素酶表達水平降低。當細胞用 PDE4D 抑制劑處理以抑制 PDE4D7 活性時，cAMP 水平恢復，從而導致更高的熒光素酶活性。

艾美捷PDE4D基于細胞的報告基因檢測試劑盒：

貨號：60505

英文名稱：PDE4D Cell-Based Reporter Assay Kit

規格：500 rxns.

同義詞：PDE4D、磷酸二酯酶 4D、PDE4D 細胞活性測定試劑盒、細胞測定試劑盒、細胞測定、報告基因測定試劑盒

提供方式：該試劑盒包括 CRE 熒光素酶報告基因（與組成型表達的海腎（海三色堇）熒光素酶載體預混合，作為轉染效率的內部對照）和 PDE4D7 表達載體

需要但未提供的材料：

? 哺乳動物細胞系和適當的細胞培養基

? 96 孔組織培養處理的白色透明底測定板（Corning # 3610）

? 哺乳動物細胞系轉染試劑

? Opti-MEM I 低血清培養基 (Invitrogen #31985-062)

? Forskolin (Sigma Aldrich #F3917)

? 兩步熒光素酶（Firefly 和 Renilla）檢測系統：

兩步熒光素酶(Firefly & Renilla) 檢測系統 (BPS Bioscience, #60683)：該系統直接在生長培養基中檢測細胞。它可以與任何光度計一起使用。不需要自動注射器。

? 光度計

PDE4D基于細胞的報告基因檢測試劑盒數據：

PDE4D基于細胞的報告基因檢測試劑盒文獻參考：

1. Montminy MR et al. (1987). Nature  328(6126):175-178

2. Fan Chung, K. (2006). Eur. J. Pharmacol.  533(1-3):110-117

3. Malik, R. et al. (2008). Appl. Microbiol. Biotechnol. 77(5): 1167-1173

BPS bioscience總部坐落于世界最大之一的美國圣地亞哥生命科學研究機構和公司集中地的中心。公司主要提供激酶、磷酸二酯酶、磷酸酶、組蛋白去甲基化酶、組蛋白甲基化轉移酶、HDACs、聚ADP核糖聚合酶。BPS公司為藥物研發用重組酶類的提供了最大選擇之一。