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特色產品PDE10A1檢測試劑盒是一種熒光偏振(FP)均相384孔板檢測試劑盒,專為篩選和分析PDE10A1(磷酸二酯酶10A1)抑制劑而設計。該檢測利用了一種特定的熒光磷酸鹽結合納米顆粒。試劑盒包含足夠的純化重組PDE10A1、熒光探針、PDE檢測緩沖液、結合劑和稀釋液,用于400次反應。
檢測使用了標記有熒光素的環狀鳥苷酸單磷酸(cAMP-FAM用于PDE10A1),其中磷酸基團參與環狀核苷酸的構成。這是一種非常小的分子,旋轉速度快(低FP)。PDE10A1催化環狀核苷酸中磷酸二酯鍵的水解,釋放出磷酸基團。在第二步中,自由的磷酸基團被特定的磷酸結合納米珠(結合劑)識別,形成一個大復合物,其運動受到限制(高FP)。FP與PDE10A1活性成正比。
在200 nM FAM-環狀-3',5'-AMP底物存在的情況下,PDE10A1與逐漸增加濃度的罌粟堿共同孵育。使用Tecan M1000熒光微孔板讀取器測量熒光偏振。結果以活性百分比表示,其中在沒有抑制劑(陽性對照)的情況下,FP被設定為100%。
艾美捷BPS Bioscience-PDE10A1檢測試劑盒:
貨號:60385
同義詞:PDE10-A1、PDE
試劑盒格式:熒光偏振
物種:人類
提供形式:PDE10A1抑制劑篩選檢測試劑盒采用方便的384孔板格式,包括純化的PDE10A1酶、熒光標記的PDE10A1底物(cAMP)、結合劑和用于400次酶反應的PDE檢測緩沖液。
所需材料但未提供:
可調節微量移液器及無菌吸頭
旋轉或搖動平臺
能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器(激發波長λex=470 nm(5 nm帶寬),發射波長λem=528 nm(10 nm帶寬))
儲存/穩定性:按照指導儲存時,該檢測試劑盒在收到后6個月內可達到最佳性能。
應用:用于研究酶動力學,以及在高通量篩選(HTS)應用中篩選小分子抑制劑以進行藥物發現。
運輸溫度:-80°C(干冰)
僅供研究使用
禁忌事項:
檢測中DMSO的最終濃度不應超過1%。
具有熒光特性的化合物可能會根據其光譜激發和發射特性干擾結果。
建議單獨測試化合物,以確定其是否可能對檢測結果產生潛在干擾。
檢測結果示例:

圖:在200 nM FAM-環狀-3', 5'-AMP底物存在的情況下,PDE10A1與逐漸增加濃度的罌粟堿共同孵育。使用Tecan M1000熒光微孔板讀取器測量熒光偏振。結果以活性百分比表示,其中在沒有抑制劑(陽性對照)的情況下,熒光偏振(FP)被設定為100%。
文獻參考:
Nishi A., et al., 2010 Pharmacol. Sci. 114:6-16.
Omori K., et al., 2007 J. Circulation Res. 100:309-327.

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