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特色產品PDE4AIsoform4檢測試劑盒是一種熒光偏振(FP)均相96孔板檢測試劑盒,專為篩選和鑒定PDE4AIsoform4(磷酸二酯酶4AIsoform4)抑制劑而設計。該檢測利用了一種特異性的熒光磷酸鹽結合納米顆粒。試劑盒包含足夠用于100次反應的純化重組PDE4AIsoform4、熒光探針、PDE檢測緩沖液、結合劑和稀釋液。
檢測中使用了帶有熒光素標記的環磷酸腺苷(cAMP-FAM,用于PDE4A),其中磷酸基團嵌入在環核苷酸中。這是一個非常小的分子,旋轉速度快(熒光偏振值低)。PDE4AIsoform4催化環核苷酸中磷酸二酯鍵的水解,釋放出磷酸基團。在第二步中,自由的磷酸基團被一種特異性的磷酸鹽結合納米珠(結合劑)識別,形成一個大復合物,其運動受限(熒光偏振值高)。熒光偏振值與PDE4AIsoform4的活性成正比。
艾美捷BPS Bioscience-PDE4A1A檢測試劑盒:
貨號:60340
同義詞:抑制劑篩選、檢測試劑盒、PDE4A、PDE4-A1A、PDE
試劑盒格式:熒光偏振
物種:人
所需材料(但未提供):
-可調節微量移液器及無菌吸頭
-旋轉或搖動平臺
-能夠測量熒光偏振的熒光微孔板讀取器(激發波長λex=470nm,帶寬5nm;發射波長λem=528nm,帶寬10nm)
靶點:PDE4AIsoformA
儲存/穩定性:按照說明儲存時,該試劑盒在收到之日起6個月內表現最佳。
應用:用于研究酶動力學以及在高通量篩選(HTS)應用中篩選小分子抑制劑以發現藥物。
運輸溫度:-80°C
僅限研究使用
禁忌事項:
-檢測中DMSO的最終濃度不應超過1%。
-熒光化合物可能會根據其光譜激發和發射特性干擾結果。
-建議單獨測試化合物以確定其對檢測結果的潛在干擾。
檢測結果示例:

圖:PDE4A在200nMFAM-Cyclic-3',5'-AMP底物存在下與Roflumilast的不同濃度共同孵育。使用TecanM1000熒光微孔板讀取器測量熒光偏振。結果以活性百分比表示,其中在沒有抑制劑(陽性對照)的情況下,FP值設為100%。
文獻參考:
Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.
Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.

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