Arthrogen-CIA：致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒實驗步驟

小鼠抗II型膠原5克隆單克隆抗體雞尾酒試劑盒，配有大腸桿菌O111:B4的內毒素（LPS）。

艾美捷CIA：致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg：

貨號：53010

應用：用于小鼠膠原抗體誘導性關節炎（CAIA）。

規格：

雞尾酒：10 mg/ml x 1 ml

LPS：0.5 mg/ml x 1.5 ml

形式：一種溶解在0.05M磷酸鹽緩沖液（pH 7.4）中的5種單克隆抗體的混合物，識別多種II型膠原的保守表位：克隆A2-10（IgG2a）、F10-21（IgG2a）、D8-6（IgG2a）、D1-2G（IgG2b）和D2-112（IgG2b）。克隆A2-10、D1-2G和D2-112識別CB11片段（124-402）中167氨基酸肽片段LyC1（124-290）內的個別表位?？寺10-21和D8-6識別CB11片段中的83氨基酸肽片段LyC2（291-374）內的表位。

來源：小鼠

交叉反應性：對大多數II型膠原物種（包括小鼠、豬、雞*、牛、人、鼠、猴、兔、馬和狗）有交叉反應。

D2-112不與雞II型膠原交叉反應。

動物：7-8周齡或更大的高反應小鼠：DBA/1、Balb/c、B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv。

低反應小鼠：C57BL/6或C57BL/6背景。對CAIA的敏感性可能因小鼠供應商和設施而異。強烈建議使用特定病原體陰性（SPF）飼養條件，而不是常規飼養條件，因為細菌污染可能會降低動物的免疫反應，導致關節炎減弱。因此，建議在進行大規模研究之前先進行小規模的初步研究。

使用：建議通過靜脈注射（即尾靜脈）給藥單克隆抗體雞尾酒；不過，也可以使用腹腔注射（IP）。此外，如果不希望使用LPS，請注意關節炎的嚴重程度往往較低。

儲存條件：-80°C

穩定性：2年

注意事項：

LPS是一種常見的細菌毒素，是免疫系統的強效刺激物。推薦的Arthrogen-CIA?雞尾酒協議利用LPS注射來觸發快速出現的重度關節炎，伴隨亞關節炎劑量的抗體。LPS的最佳劑量可能因小鼠品系、動物供應商和飼養條件而異。高劑量的LPS可能對實驗動物致命，甚至50 μg/只，具體取決于動物的條件。因此，Chondrex, Inc.建議首先進行無抗體給藥的初步研究，以優化LPS劑量（50 μg、25 μg和可能的10 μg，分別測試每個劑量并使用多只小鼠），然后再進行大規模CAIA研究。

Arthrogen-CIA：致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg實驗步驟：

A. 在CAIA易感小鼠（DBA/1、Balb/c、B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv）中用單克隆抗體雞尾酒和LPS誘導關節炎

第0天：通過靜脈或腹腔注射1.5 mg的5克隆雞尾酒。

第3天：通過腹腔注射25-50 μg的LPS。

注意：在第3-4天觀察到中度至重度關節炎，約在第7-10天達到高峰。

B. 在CAIA低反應小鼠（C57BL/6或C57BL/6背景）中用單克隆抗體雞尾酒和LPS誘導關節炎

第0天：通過靜脈或腹腔注射5 mg的5克隆雞尾酒。

第3天：通過腹腔注射25-50 μg的LPS。

注意：在第3-4天觀察到中度至重度關節炎，約在第7-10天達到高峰。第10-14天注射LPS可用于重新刺激炎癥性關節炎。

C. 在DBA/1和Balb/c小鼠中用不含LPS的單克隆抗體雞尾酒誘導關節炎

第0天：通過靜脈注射6-10 mg的5克隆雞尾酒。

注意：在第2-3天可觀察到關節炎。該協議尚未在其他CAIA易感小鼠品系（如B10.RIII、C.B-17、scid/scid或129/Sv小鼠）中確認。

Arthrogen-CIA：致關節炎單克隆抗體5-克隆混合物試劑盒-10 mg文獻參考：

K. Terato et al. J. Immunol. 148: 2103-2108 (1992)

K. Terato et al. Autoimmunity 22: 137-147 (1995)

S. Yoshino et al. J. Immunol Methods 343: 49-55 (2009)