SYSY m6A 抗體：助力RNA甲基化研究

SYSY是m6A特異性抗體的D一家商業供應商。我們的產品已在700多篇科研發表論文中使用，從而使得研究RNA甲基化的全新方法得以發展。單克隆和重組抗體變體的開發使得非常成功的多克隆抗m6a抗體得到了補充，并保證了Z佳的可重復性和批次間一致性?？筸6A抗體適用于廣泛的應用，例如MeRIP、m6A-CLIP和miCLIP測序，經典IP、斑點印跡和ELISA。

m6A 抗體

簡介

DNA和RNA水平上的核酸修飾在許多不同的生物過程中起著重要作用。在原核生物中，在DNA 5'-GATC-3'模序上腺苷殘基的DAM甲基化使得細胞可在錯配修復過程中區分親本鏈和子鏈（A L Lu, D Y Chang, 1988）。在真核生物中，DNA不同的可遺傳CpG甲基化模式在基因表達的差異表觀遺傳調控中發揮重要作用（Meehan et al., 1992）。

RNA分子受多種轉錄后修飾的影響。在成熟過程中，mRNA分子經歷剪接、5′加帽和3′-聚腺苷酸化，這些都是獲得具有完備功能的mRNA所必需的（Carter, 1994）。

最近，單核苷酸殘基的其他化學修飾已表明會參與蛋白質翻譯和RNA加工及其穩定性的微調。其中Z重要的修飾是不同RNA殘基在不同位置的甲基化，如m1A、m5C、 m6Am和最后但同樣重要的N6 -甲基腺苷，也稱為m6A，它是Z豐富且可能也是Z重要的RNA甲基化變體（Zhou et al., 2020）。而像METTL甲基化轉移酶復合物這樣的m6A writers和像FTO這樣的去甲基化erasers （圖1），它們可在甲基化轉移酶識別位點上微調m6A RNA修飾的可逆狀態，即所謂的DRACH模序（Sergeeva et al., 2020）。SYSY抗體從一開始便參與其中。

圖1： 轉錄后RNA甲基化和去甲基化是由writers （METTL復合體）和erasers （如FTO）進行的。而由此產生的位點特異性RNA修飾會進一步影響RNA加工、翻譯和穩定性。

探索一切的起點，剪接體

1987年，Peter Bringmann和Reinhard Luehrmann開發了第一個針對m6A的多克隆抗體，用于研究這種RNA修飾在真核剪接體中的相關性。這些抗體使得m6A修飾的小核RNA （snRNAs） U2、U4和U6能夠從小核蛋白（snRNPs）中定量免疫分離（Bringmann, Lührmann, 1987）。

1997年，SySy將R. Luehrmann和P. Bringmann的原始m6A抗血清納入其目錄，成為了m6A特異性抗體的第一家商業供應商。

通過MeRIP測序發現m6ARNA甲基化

隨后，N6 -甲基腺苷或m6A修飾被證實參與了更多的轉錄后調控過程，而轉錄組的m6A甲基化成為一個全新的、快速發展的研究領域。Kate Meyer （Meyer et al., 2012）和Dan Dominissini （Dominissini et al., 2012 and 2013）發表的關鍵論文為我們親和純化的m6A兔多克隆抗體（cat. no. 202 003）在全球的成功鋪平了道路。Meyer和Dominissini也開發了基于抗體的m6A測序方法，這是一種基于對攜帶m6A修飾的免疫分離RNA片段（100 -200 nt長）進行平行測序的方法（圖2）。

圖 2：MeRIP測序是基于對免疫分離m6A修飾的RNA片段的平行測序。

這種新技術，又名為MeRIP測序，使得科學家能夠發現眾多轉錄后調控機制，且所有這些機制都是由m6A修飾調節的，也引起了科學發表論文數量的持續增長（圖3）。

 圖3：m6A相關的科學發表論文數量隨著時間的發展而增長。

結果發現M6A峰富集在3' -UTR區域、停止密碼子附近和長外顯子內（7、8）。研究表明，m6A修飾可以影響RNA生命周期的每個過程，以及許多生理過程，例如干細胞發育、翻譯調節、癌癥、脂肪形成等等（Linder et al., 2015）。

先進技術

通過MeRIP測序，m6A殘基可以映射到100-200 nt長區域。通過將m6A修飾分配到已識別的DRACH模序上，可以極大縮小m6A殘基的確切位置。然而，對于單核苷酸分辨率，必須開發更先進的技術。M6A - clip和miCLIP是基于m6A位點特異性UV誘導的交聯抗體，在cDNA合成過程中會誘導可預測的突變和截斷模式。這使得m6A殘基的映射更加精確（Linder et al., 2015, Ke et al., 2015）。

SYSY抗體可助你在RNA甲基化研究中更勝一籌！

參考文獻：

A L Lu, D Y Chang, 1988: Repair of single base-pair transversion mismatches of Escherichia coli in vitro: correction of certain A/G mismatches is independent of dam methylation and host mutHLS gene functions. PMID: 3284785

Bringmann, Lührmann, 1987: Antibodies specific for N6-methyladenosine react with intact snRNPs U2 and U4/U6. PMID: 2951275

Carter, 1994: Spatial localization of pre-mRNA transcription and processing within the nucleus. PMID: 7765739

Dominissini et al., 2012: Topology of the human and mouse m6A RNA methylomes revealed by m6A-seq. PMID: 22575960

Dominissini et al., 2013: Transcriptome-wide mapping of N(6)-methyladenosine by m(6)A-seq based on immunocapturing and massively parallel sequencing. PMID: 23288318

Ke et al., 2015: A majority of m6A residues are in the last exons, allowing the potential for 3' UTR regulation. PMID: 26404942

Linder et al., 2015: Single-nucleotide-resolution mapping of m6A and m6Am throughout the transcriptome. PMID: 26121403

Meehan et al., 1992: Transcriptional repression by methylation of CpG. PMID: 1297654

Meyer et al., 2012: Comprehensive analysis of mRNA methylation reveals enrichment in 3' UTRs and near stop codons. PMID: 22608085

Sergeeva et al., 2020: Modification of Adenosine196 by Mettl3 Methyltransferase in the 5'-External Transcribed Spacer of 47S Pre-rRNA Affects rRNA Maturation. PMID: 32344536

Zhou et al., 2020: Principles of RNA methylation and their implications for biology and medicine. PMID: 32920520

Synaptic Systems（SySy）品牌成立于德國，專注于研發和生產針對突觸和神經科學相關抗體，以及用于細胞生物學、組織病理學和高分辨率顯微鏡的各種抗體，除此之外，還推出與SySy抗體配套使用的試劑盒、試劑等產品組合，全方面滿足客戶的各種需求?？贵w產品線主要有：突觸活性區域相關抗體、突觸后蛋白相關抗體、RNA修飾如m6A抗體、突觸粘附蛋白抗體、SNARE相關抗體、Alzheimer's相關抗體、細胞骨架、離子通道相關抗體等。該品牌產品專業且質量好，在國內外備受好評。作為SySy在中國的區域總代理，艾美捷科技有限公司將為中國客戶提供全面的SySy產品。