PDE5A1檢測試劑盒，專為篩選和鑒定PDE5A1抑制劑而設計

磷酸二酯酶（PDEs）在通過水解作用動態調節第二信使cAMP（環狀腺苷酸）和cGMP（環狀鳥苷酸）的信號傳導中發揮著重要作用。PDE超家族由11個家族組成，其中PDE4、7和8是cAMP特異性水解酶，從而調節對cAMP的正向和負向反應。PDE5在多種組織中表達，如肺、腦、腎、心肌細胞、血小板和陰莖海綿體。它通過磷酸化激活，并通過亞硝基化靶向降解。PDE5在血管張力、視覺、腎和腸道功能、蠕動、細胞生長和凋亡、癌癥等方面發揮著作用。其功能使其成為藥物干預的首選靶點。抑制劑的開發，主要是針對催化結構域的競爭性抑制劑，促成了西地那非、他達拉非、伐地那非和阿伐那非的商業化，這些藥物用于治療勃起功能障礙、肺動脈高壓和下尿路癥狀（LUTS）。PDE5抑制劑還顯示出作為癌癥治療的潛力，當在結直腸癌（CRC）術后使用PDE5抑制劑時，轉移風險降低。繼續了解PDE5的作用以及開發新的特異性治療工具，將為PDE5相關疾病開辟新的治療途徑。

PDE5A1檢測試劑盒是一種熒光偏振（FP）均相384孔板試劑盒，專為篩選和鑒定PDE5A1（磷酸二酯酶5A1）抑制劑而設計。該試劑盒利用了一種特定的熒光磷酸鹽結合納米顆粒。試劑盒包含足夠用于400次反應的純化重組PDE5A1、熒光探針、PDE檢測緩沖液、結合劑和稀釋液。

檢測使用了標記有熒光素的環狀鳥苷酸單磷酸（cGMP-FAM用于PDE5A1），其中磷酸基團嵌入在環狀核苷酸中。這是一種非常小的分子，旋轉速度快（FP值低）。PDE5A1催化環狀核苷酸中磷酸二酯鍵的水解，釋放出磷酸基團。在第二步中，自由的磷酸基團被一種特定的磷酸鹽結合納米珠（結合劑）識別，形成一個大復合物，其運動受到限制（FP值高）。FP值與PDE5A1活性成正比。

該檢測需要一臺能夠測量熒光偏振（FP）的熒光微孔板讀取儀，并配備用于讀取FP信號的必要部件。如需了解更多關于FP技術的信息，請訪問我們的技術說明：FP、檢測原理及應用。

艾美捷BPS Bioscience-PDE5A1檢測試劑盒：

貨號：60351

試劑盒格式：熒光偏振

物種：人類

產品形式：試劑盒包含足夠用于400次反應的純化重組PDE5A1、熒光探針、PDE檢測緩沖液、結合劑和稀釋液。

儲存/穩定性：如果按照說明儲存，該試劑盒在收到之日起6個月內可達到最佳性能。

應用范圍：用于研究酶動力學，并在高通量篩選（HTS）應用中篩選小分子抑制劑以助力藥物發現。

運輸溫度：-80°C

科學分類：磷酸二酯酶

僅限研究使用

禁忌事項：

檢測中DMSO的最終濃度不應超過1%。

具有熒光特性的化合物可能會根據其光譜激發和發射特性干擾檢測結果。

建議單獨測試化合物，以確定其是否會對檢測結果產生潛在干擾。

檢測結果示例：

圖：PDE5A1與不同濃度的伐地那非（#27776）在300 nM FAM-環狀-3'，5'-GMP底物存在下孵育。使用Tecan M1000熒光微孔板讀取儀測量熒光偏振，該儀器配備用于FP的裝置。結果以活性百分比表示，其中無抑制劑（陽性對照）時的FP值設為100%。

文獻參考：

Ahmed W., et al., 2021 Biomedicine & Pharmacotherapy 134:111128.

Huang W., et al., 2020 Nat Commun 11:3191.