Jackson丨艾美捷代理AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u鏈特異性)：特性與應用指南

在免疫學研究中，特異性識別免疫球蛋白M(IgM)這一在初次免疫應答中率先產生的關鍵抗體，對于理解B細胞激活、自身免疫性疾病及感染早期過程至關重要。AffiniPure山羊抗小鼠IgM(u鏈特異性)（貨號：115-005-020）便是一款經過精心設計與純化的高特異性工具，能夠精準地用于檢測小鼠來源的IgM分子。本文旨在系統介紹該抗體的核心特性、應用優勢、使用規范及相關的實驗證據。

Jackson 總部位于美國賓夕法尼的蘭卡斯特，距離費城大概有40英里。Jackson在1982年由科學家展開了包括在細胞生物學，蛋白質化學，微生物學，免疫學及產品開發實驗研究。 Jackson產品僅用于研究，不用于診斷或治療用途。作為美國各種二抗生產公司之一，Jackson在各國設有幾十家代理。由于其產品效價 高、種類全、價格低廉，因而成為各大藥廠、試劑盒生產廠、大型實驗室采購此類試劑的優選。其產品主要包括：各種純化的二抗、標記的二抗（AMCA、 Cy2、FITC、Cy3、TRITC、RRX、TR、Cy5、長臂生物素、辣根酶和堿磷酶標記）等。

一、核心產品特性：卓越的特異性與經典格式

本品是一款以山羊作為宿主的全分子IgG抗體，其設計核心在于特異性靶向小鼠IgM分子的重鏈。

靶標與特異性：該抗體的最大特點在于其u鏈特異性。這意味著它通過免疫電泳和/或ELISA方法驗證，能夠特異性地與小鼠IgM分子的重鏈（u鏈）結合，而不與小鼠IgG或小鼠免疫球蛋白的輕鏈發生反應。這種對重鏈的專一性識別，確保了在含有混合免疫球蛋白的復雜樣本（如血清）中，能夠準確無誤地檢測出IgM，而不會受到IgG的干擾。驗證同時表明，未檢測到其對非免疫球蛋白血清蛋白的反應性，保證了低背景和高信噪比。但需注意，該抗體可能與其他物種的IgM發生交叉反應，在涉及多物種樣本的實驗設計中應予以考慮。

抗體格式與結構：本品為全IgG形式?？贵w分子通過免疫親和層析技術從抗血清中分離，保持了完整的天然結構：包含一個Fc片段和兩個通過二硫鍵連接的抗原結合Fab片段，因此具有二價結合能力，親和力更高。其分子量約為160kDa。全IgG抗體形式適用于絕大多數免疫檢測流程（如ELISA、WesternBlot、免疫沉淀等），并且在成本效益方面頗具優勢。

克隆性與純化：屬于多克隆抗體，能夠識別IgMu鏈的多個表位，通?？商峁└鼜姷男盘柡透叩臋z測靈敏度。產品通過將小鼠IgMu鏈抗原偶聯至瓊脂糖珠上進行免疫親和層析純化，從而獲得了J高的純度，有效去除了非特異性抗體和雜蛋白。

標記狀態：本品為未偶聯形式。這為用戶提供了J大的靈活性，可以根據實驗需求，自行選擇與不同的報告分子（如酶HRP、AP，熒光染料Cy3、FITC等）進行偶聯，或者直接用于需要間接檢測法（使用標記的二抗）的實驗方案中。

二、使用、儲存與穩定性指南

物理狀態與儲存：與常見的凍干粉形式不同，本品以無菌過濾液體形式提供。應在2-8°C條件下無菌儲存，避免冷凍。

工作液制備：抗體工作稀釋液建議在使用當天新鮮配制。

有效期：自收貨之日起，產品有效期為一年。若經性能測試驗證，其活性仍滿足實驗要求，有效期可酌情延長。

緩沖體系與防腐劑：抗體溶解于pH7.6的0.01M磷酸鈉和0.25MNaCl緩沖液中。值得注意的是，產品未添加任何防腐劑（如疊氮鈉），這使得它非常適用于細胞培養相關實驗或體內注射研究，而無需擔心防腐劑的細胞毒性或干擾作用。其無菌過濾的處理也進一步支持了此類應用。

工作濃度建議：對于大多數應用，推薦的工作濃度為10-20ug/ml。與稀釋倍數范圍不同，直接提供濃度范圍更具科學性，因為它排除了原液濃度差異的影響。同樣，最佳工作濃度受抗原密度、檢測系統靈敏度等多種因素影響，強烈建議通過預實驗進行經驗性優化。

三、應用實例：在前沿研究中的價值體現

產品說明中引用的文獻數據（關于半乳糖凝集素-9，Galectin-9）生動地展示了該抗體的實際應用價值：

在一項旨在鑒定Galectin-9相互作用蛋白的研究中，研究人員使用了FLAG標記的重組Galectin-9(rGal9)與磁珠偶聯進行Pull-down實驗。

1.免疫印跡驗證：通過使用lactose將結合的配體洗脫后，研究者利用這款u鏈特異性的山羊抗小鼠IgM抗體進行免疫印跡分析。結果清晰地顯示，只有在有rGal9存在的條件下，才能特異地檢測到小鼠IgM被Pull-down，而對照組則沒有信號。這直接證明了Galectin-9能夠與IgM結合。

2.Far-Western分析：在另一項實驗中，研究人員將不同細胞系（包括原代小鼠B細胞、A20B細胞等）的裂解物進行電泳并轉膜，然后直接用FLAG標記的rGal9作為探針進行Far-Westernblot分析。隨后，再次使用該抗體對同一張膜進行檢測，作為參照，確認了IgM的存在位置，并驗證了rGal9與膜上IgM的直接結合。

這些實驗數據有力地證明了本品在復雜生物學相互作用研究中的高特異性和可靠性。它不僅能夠用于常規的免疫檢測，更能勝任像Pull-down、Far-Western這樣的前沿技術，是探索IgM相關生物學功能的得力工具。

四、WB實驗文獻參考：

Galectin-9 binds IgM-BCR to regulate B cellsignaling.

In Nat Commun on 17 August 2018 by Cao,A.,Alluqmani,N.,et al.

Galectin-9 與 IgM-BCR 和 CD45 的結合

a Pull-down 實驗示意圖：使用與磁珠偶聯的 FLAG 標簽重組 Galectin-9（rGal9）進行實驗。與 Galectin-9 相互作用的配體通過乳糖處理被洗脫，隨后通過質譜法進行鑒定。

b 將包被了 rGal9（+rGal9）或未包被 rGal9（-rGal9）的磁珠上經乳糖洗脫的蛋白質，或在存在（+lac）或不存在（-lac）乳糖的條件下，進行 SDS-PAGE，隨后使用 CD45 和 IgM 特異性抗體進行免疫印跡分析。

c 對來自原代小鼠 B 細胞（泳道 1）、表達 Hel 特異性 IgM 的 A20 B 細胞（D1.3；泳道 2）、A20 B 細胞（泳道 3）和 Jurkat T 細胞（泳道 4）的細胞裂解液進行裂解，并使用 FLAG 標簽的 rGal9 進行 Far-western 分析。右側顯示了針對 CD45 和 IgM 的參考印跡結果。所示數據代表三次獨立實驗。

五、熱門產品

艾美捷科技是Jackson的中國代理商，為科研工作者提供優質的產品與服務。