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脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)檢測原理&結果計算

發布者:艾美捷科技    發布時間:2025-02-05     
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脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)是一種用于定量檢測人血清和血漿(EDTA或檸檬酸鹽)中脫氫表雄酮(DHEA)的酶聯免疫吸附測定。該設備旨在用于診斷具有腎上腺功能減退、男性化、21-羥化酶缺乏癥或多毛癥跡象的個體。該設備不用于檢測腎上腺腺瘤和腎上腺癌。僅用于研究目的。

 

艾美捷脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)【#ALP-11-HEAHU-E01】檢測原理:

DHEA ELISA試劑盒是一種基于競爭結合原理的固相酶聯免疫吸附測定(ELISA)。微孔板表面涂有一層針對DHEA分子抗原位點的多克隆(兔)抗體。在第一次孵育過程中,樣本中的內源性DHEA與DHEA-辣根過氧化物酶結合物競爭與包被抗體的結合位點。孵育完成后,未結合的結合物被洗去,固相部分再與底物溶液孵育。通過加入終止液停止顯色反應,測量生成的黃色產物的吸光度(OD)。顏色的強度與樣本中分析物的濃度成反比。通過繪制標準曲線(以OD值為縱軸,標準品濃度為橫軸),可以確定未知樣本的濃度。

 

所需材料(未提供):

校準的微孔板讀數儀(450 nm,參考波長為620至630 nm)

校準的可變精度微量移液管

手動或自動微孔板清洗設備

吸水紙

蒸餾水

計時器

半對數坐標紙或數據處理軟件

 

結果計算:

樣本濃度可以直接從標準曲線上讀取。

對于重復測定,必須取每個標準品、質控品和樣本的兩個吸光度(OD)值的平均值。如果兩個值差異較大,ALPCO建議重新檢測樣本。

濃度超過最高標準的樣本可以用標準0進一步稀釋,并按照“檢測程序”重新檢測,或者報告為>30 ng/mL。計算濃度時,必須考慮稀釋倍數。

(例如:1:10稀釋:10 ?L樣本 + 90 ?L標準0)

 

自動化方法:

說明書中給出的結果是通過四參數邏輯(4PL)曲線擬合自動計算得出的(4PL Rodbard或4PL Marquardt是首選方法)。其他數據處理方法可能會得出略有不同的結果。

 

手動方法:

使用半對數坐標紙,通過繪制每個標準品的(平均)OD值與其濃度的關系來構建標準曲線(以OD值為縱軸,濃度為橫軸)。通過每個樣本的(平均)OD值在標準曲線上確定相應的樣本濃度。

典型標準曲線示例

以下數據僅用于演示,不能替代實際檢測時生成的數據。

脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)

 

脫氫表雄酮ELISA試劑盒(DHEA)文獻參考:

1. Mo Q et al (2006) Dehydroepiandrosterone and its metabolites: differential effects on androgen

receptor trafficking and transcriptional activity. J. Steroid Biochem. Mol. Biol.; 99 (1):50-8

2. Webb SJ et al, (2006). The biological actions of dehydroepiandrosterone involves multiple

receptors. Drug Metabolism Reviews; 38 (1-2): 89-116

3. Chen et al (2005). Direct agonist/antagonist functions of dehydroepiandrosterone.

Endocrinology; 146 (11): 4568-76.

4. Kamrath et al (2013). Androgen synthesis in patients with congenital adrenal hyperplasia due

to 21-hydroxylase deficiency. Horm. Metab. Res.; 45 (2):86-91.

5. Savineau JP et al. (2013). Role of DHEA in cardiovascular diseases. Biochem. Pharmacol; 15;

85(6):7-18-26.

6. Traish et al (2011). DHEA - a precursor steroid or an active hormone in human physiology. J

Sex Med. 8(11):2960-82

7. Rachon D. (2012). Differential diagnosis of hyperandrogenism in women with polycystic ovary

syndrome. Exp. Clin Endocrinol. Diabetes. 120(4): 205-9

8. Sciarra et al (1995). Androgen-secreting adrenal tumors. Minerva Endocrinol. 20(1):63-8

9. Miller WL. (2002). Androgen biosynthesis from cholesterol to DHEA. Mol Cell Endocrinol. 30;

198(1-2): 7-14.


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