Ethos Biosciences-Albuwell M：定量檢測小鼠尿液中的白蛋白

Ethos Biosciences-Albuwell M是一種用于評估小鼠腎功能的體外工具。它操作簡單，并且對小鼠白蛋白具有高度特異性。它是一種競爭性抗體捕獲ELISA，以直接模式完成。為此，抗白蛋白抗體與辣根過氧化物酶（抗小鼠白蛋白抗體-HRP）偶聯，即直接標記。  

為了完成檢測，樣本和抗小鼠白蛋白抗體-HRP被加入到涂有小鼠白蛋白的孔中。抗體與固定相上的白蛋白或流動相中的白蛋白相互作用并結合，因此稱為競爭性結合。洗滌步驟會去除未結合的抗小鼠白蛋白抗體-HRP和流動相中的其他反應物。只有與固定相白蛋白結合的抗體-偶聯物會保留下來，并通過四甲基聯苯胺（TMB）的顯色反應進行檢測。反應通過酸終止，并在450 nm處測量吸光度。吸光度與流動相中白蛋白濃度的對數成反比。

預期用途 ：

Albuwell? M是一種酶聯免疫吸附測定（ELISA），用于定量檢測小鼠尿液中的白蛋白。

樣本收集與儲存 ：

收集樣本時不使用防腐劑，并在必要時通過離心澄清。小鼠尿液常被食物和糞便污染，這些污染物是潛在的誤差來源。澄清的尿液可在4°C下保存長達1周，或在-60°C下保存長達2個月。在檢測前，讓樣本恢復至室溫。不要用加熱的方式解凍冷凍樣本。

艾美捷Ethos Biosciences-Albuwell M試劑盒（#1011）內容：

- 2塊Albuwell M檢測板  

- 2瓶NHEBSA（稀釋液）  

-小鼠血清白蛋白（MSA）標準品  

- 2瓶抗小鼠白蛋白抗體-HRP偶聯物  

- 2瓶顯色劑  

- 2瓶終止液  

-說明書  

MSA標準品、NHEBSA和抗小鼠白蛋白抗體-HRP偶聯物中含有0.05% Proclin? 300（活性成分為異噻唑啉酮）作為防腐劑。終止液含有稀釋的（2.0 N）硫酸。  

Albuwell M檢測板已預涂并可直接使用。試劑盒中的其他試劑均以即用型液體形式提供。實驗和質量控制中已證明使用自來水進行洗板是合適的。然而，如果自來水不可用或不適用，我們推薦使用Ethos Dilurex? TEA洗液（pH 6.8），該洗液有10倍和1倍濃度可供選擇。

額外所需用品  ：

需要能夠分裝10 ?L、50 ?L、100 ?L、120 ?L和200 ?L的微量移液器。推薦使用能夠分裝50 ?L和100 ?L的多通道移液器。此外，完成稀釋需要小試管（在這種應用中，微量離心管效果良好）。最后，需要一臺能夠測量450 nm吸光度的微孔板讀數儀。

圖1. 競爭性ELISA在樣本中存在白蛋白時信號會降低。辣根過氧化物酶（HRP）分子直接連接到抗小鼠白蛋白抗體的Fc區，從而無需添加標記的二抗。左側圖表示試劑盒中A2孔的情況。右側圖表示在B1至H2孔中加入MSA標準品的情況。樣本中白蛋白越多，吸光度讀數越低，因為抗小鼠白蛋白抗體-HRP偶聯物會從流動相中被洗脫，而不是結合到板上。

所選引文：

Nature Blocking VEGFR-3 suppresses angiogenic sprouting and vascular network formation

Nat. Med. Pyruvate kinase M2 activation may protect against the progression of diabetic glomerular pathology and mitochondrial dysfunction

Nat. Med. Transgenic expression of human APOL1 risk variants in podocytes induces kidney disease in mice

Nat. Med. Tracking the fate of glomerular epithelial cells in vivo using serial multiphoton imaging in new mouse models with fluorescent lineage tags

Nat. Med. Angiotensin receptor agonistic autoantibodies induce pre-eclampsia in pregnant mice

Nat. Genet. Common variation in GPC5 is associated with acquired nephrotic syndrome

J. Am. Coll. Cardiol. Cardiovascular and systemic microvascular effects of anti-vascular endothelial growth factor therapy for cancer

Sci Transl Med Arginase-1-dependent promotion of TH17 differentiation and disease progression by MDSCs in systemic lupus erythematosus

Am. J. Respir. Crit. Care Med. Segmental antigen challenge increases fibronectin in bronchoalveolar lavage fluid

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