SySy-標記循環突觸小泡相關產品

在上一篇文章中，小艾介紹了神經信號如何在神經元中進行傳遞的：http://www.zihai029.com/featured/synapse-2.shtml

神經元通過突觸相互交流，其中電化學信號轉化為生化信號。信息通過釋放神經遞質進入突觸間隙傳遞，并在突觸后側被相應的受體蛋白接收【1】。在此過程中，突觸囊泡與突觸前膜融合，使內囊泡膜暫時暴露于細胞外空間。

在培養的海馬神經元中，管腔蛋白表位因此可以被添加到培養基中的抗體結合，然后在隨后的網格蛋白介導的內吞作用中摻入突觸小泡【2】。內吞作用后，突觸小泡的內腔被質子 ATP 酶重新酸化。由此產生的質子梯度需要用由特定囊泡神經遞質轉運蛋白介導的神經遞質分子重新加載突觸囊泡，為下一輪融合做好準備 【3】。

通過這種方法，可以選擇性標記具有持續囊泡循環的活躍突觸（圖1）。例如，如果應用針對 Synaptotagmin1 的抗體，則所有活躍的突觸都會獨立于其神經遞質表型進行標記（圖2）。相比之下，針對囊泡 GABA 轉運蛋白 (VGAT) 的抗體允許選擇性標記專門激活的抑制性突觸【4】。pH 敏感熒光染料，例如CypHer5E和AcidiFluor Orange，僅在酸性環境中才會發熒光。因此，相應的抗體偶聯物非常適合檢測活細胞中的再循環突觸囊泡，因為它們僅在抗體完全內化和突觸囊泡腔重新酸化后才會亮起（圖2）。

圖1：用針對突觸囊泡蛋白管腔表位的熒光染色抗體標記回收突觸囊泡。

圖2：在培養的海馬神經元中標記回收囊泡（貨號105 311AF）。活細胞與培養基中的標記抗體一起溫育30分鐘。

當使用一級標記抗體時，無需額外固定、透化或應用任何二級試劑，即可直接觀察回收囊泡?；蛘撸梢詫⒁豢古cNanoTags 二級 FluoTag預孵育以形成一二抗體復合物。然后，這些復合物可以像初級標記抗體一樣用于直接標記活神經元。

Synaptic Systems 提供針對突觸囊泡蛋白管腔表位的獨特抗體組合，適用于回收囊泡的活性依賴性標記。一組不同的熒光團偶聯物可滿足您的確切需求。

推薦產品

Synaptotagmin1（多克?。?/strong>

Synaptotagmin1（單克?。?/strong>

Synaptotagmin2（多克隆）

VGAT（多克?。?/p>

參考文獻

【1】Sudhof，2004 年：突觸小泡循環。

【2】Kraszewski 等人，1995 年：活體培養海馬神經元中的突觸小泡動力學，用針對突觸結合蛋白管腔結構域的 CY3 偶聯抗體進行可視化。

【3】Gasnier，2000：將神經遞質加載到突觸小泡中。

【4】Martens 等人，2008 年：VGAT-C 末端的獨特管腔定位允許選擇性標記活動的皮質 GABA 能突觸。

想要了解更多產品資訊，就來聯系小艾吧！或者掃描下方二維碼，即可聯系您的專屬客服哦~