Assay Genie：大鼠TNF-α ELISpot試劑盒

腫瘤壞死因子-α（Tumor Necrosis Factor-α, TNF-α），也稱為惡病質素，是一種由單核細胞和巨噬細胞產生的多肽細胞因子。 它作為一種多能免疫反應調節因子發揮作用，并且還是一種強效致熱原。TNF-α在體內循環，響應刺激（如病原體或組織損傷），激活中性粒細胞，改變血管內皮細胞的特性，調節其他組織的代謝活動，并通過誘導局部血栓形成發揮抗腫瘤活性。此外，TNF-α抑制脂肪蛋白脂肪酶的活性，從而導致惡病質，這是一種身體消耗的狀況。由于TNF-α在免疫系統中的多樣化作用，它可能在許多疾病的發病機制中發揮作用。

TNF-α的產生是由淋巴因子和內毒素對巨噬細胞的作用介導的。 純化的單核細胞在重組IL-2刺激后4小時內產生TNF-α，并且有體外證據表明，TNF-α在通過CD2和CD28刺激的T細胞中以高水平和延長的動態學表達。γ干擾素增強了TNF-α的分泌，TNF-α隨后誘導或增強I類MHC抗原、GM-CSF和IL-1的特異性產生。

Assay Genie的大鼠TNF-α ELISpot是一種高度特異性的免疫分析方法，用于在接近體內環境的條件下，以最小的細胞操作分析T細胞產生的TNF-α的生成和分泌情況，能夠檢測到單個細胞水平的變化。該技術旨在確定在特定刺激下產生TNF-α的細胞頻率，并將其與特定治療或病理狀態下的頻率進行比較。利用夾心免疫酶技術，Assay Genie 大鼠TNF-α ELISpot檢測方法不僅可以檢測分泌的TNF-α（定性分析），還可以檢測產生TNF-α的單個細胞（定量分析）。細胞分泌的TNF-α被包被抗體捕獲，避免了其在上清液中的擴散、蛋白酶降解或與可溶性膜受體結合。

大鼠TNF-α ELISpot試劑盒檢測原理：高度特異性地針對TNF-α的捕獲抗體，包被于PVDF（聚偏氟乙烯）96孔微孔板的孔底。接下來，對微孔板進行封閉處理，以最大限度減少非抗體依賴的非特異性結合，然后進行洗滌。加入細胞懸浮液和刺激物后，將微孔板孵育，使特異性抗體能夠結合任何產生的TNF-α。通過洗滌去除細胞后，加入生物素標記的檢測抗體，這些抗體與之前捕獲的TNF-α結合。隨后，加入酶偶聯的鏈霉親和素，使其與檢測抗體結合。經過孵育和洗滌后，將底物加入孔中，產生可被適當分析軟件定量或通過顯微鏡手動計數的有色斑點。